[发明专利]用于软骨原位再生的组合物及软骨再生方法

说明书

技术领域

本发明涉及基因工程药物领域，尤其涉及一种用于软骨原位再生的组合物及软骨再生方法。

背景技术

骨关节炎又称退行性关节炎，是关节炎的最常见形式，也是世界上导致残疾的第四首要原因。它影响70％以上的介于55岁到70岁之间的老年人。由于中国人口基数大，老龄化严重，骨关节炎发生更为普遍。据估计，中国的骨关节炎患者已超过6500万人。骨关节炎的主要特征是关节软骨的逐渐分解，并最终导致滑膜性关节的功能故障。在骨性关节炎中，软骨表面层断裂和磨损，使得软骨下的骨头间直接摩擦，引起疼痛，肿胀，妨碍关节的运动。随着时间的推移，关节可能会变形。此外，在骨骨接面处，会长骨的凸起，称为骨赘或骨刺。小片骨组织或软骨组织可以脱落并在关节腔内漂浮，导致更多的痛苦和伤害。软骨由于缺乏神经的支配和血管的供应，其自身再生能力很差，如何有效地修复关节软骨一直是临床上的一大难题。在骨性关节炎中，软骨组织多处有破损，并引起炎症。疼痛和行动困难是患者的最大问题。

目前世界上对骨关节炎没有有效的治疗手段，现有的主要治疗方法包括止痛治疗和物理治疗，但只针对症状，不能改变疾病的过程。大部分患者的骨关节炎会随时间恶化，最后只能求助于全关节置换。

发明内容

本发明所解决的技术问题在于提供一种的用于软骨再生，修复软骨损伤软骨原位再生的组合物及软骨再生方法。

为解决上述技术问题，本发明提供了一种用于软骨原位再生的组合物，所述组合物包括缓冲液，所述缓冲液中包含1微摩尔/升-1毫摩尔/升的蛋白药。

更进一步的，所述蛋白药为SOX9蛋白药。

更进一步的，所述缓冲液还包括蔗糖、精氨酸、氯化钠、氯化钾、甘油。

更进一步的，所述蔗糖、精氨酸、氯化钠、氯化钾、甘油的物质的量分别为1-5份、2-3份、1-10份、0.2-1份、2-10份。

更进一步的，所述蔗糖、精氨酸、氯化钠、氯化钾、甘油的物质的量的总和不小于10微摩尔。

一种软骨原位再生方法，其用于使关节腔内或附近的软骨细胞原位再生，在所述关节腔内注射缓冲液，所述缓冲液包含1微摩尔/升-1毫摩尔/升的蛋白药，以使所述蛋白药进入所述软骨细胞的祖细胞、前身细胞或干细胞内，且使所述蛋白药进入所述软骨细胞的祖细胞、前身细胞或干细胞的细胞核内。

更进一步的，所述蛋白药为可进入细胞的SOX9蛋白药。

更进一步的，所述缓冲液还包括蔗糖、精氨酸、氯化钠、氯化钾、甘油。

更进一步的，所述蔗糖、精氨酸、氯化钠、氯化钾、甘油的物质的量分别为1-5份、2-3份、1-10份、0.2-1份、2-10份。

更进一步的，所述蔗糖、精氨酸、氯化钠、氯化钾、甘油的物质的量的总和不小于10毫摩尔。

本发明用蛋白药的方式激活或诱导关节腔内的软骨细胞的祖细胞或干细胞，使其繁殖或/和分化成软骨细胞，导致软骨再生，修复软骨损伤；也就是说，利用人体自身的细胞，用蛋白药加以诱导，产生新的软骨细胞和组织，以全面修复软骨损伤；该体系蛋白表达量高，可控性强，生产成本相对较低，且具有良好的生物学活性，容易实现大规模生产。

具体实施方式

下面详细描述本发明的实施方式，所述实施方式中示出，其中自始至终相同或类似的标号表示相同或类似的元件或具有相同或类似功能的元件。下述实施例旨在用于解释本发明，而不能理解为对本发明的限制。

本实施例提供一种用于软骨原位再生的组合物，所述组合物包括缓冲液，所述缓冲液中包含1微摩尔/升-1毫摩尔/升的蛋白药。本发明的用于软骨原位再生的组合物，用蛋白药的方式激活或诱导关节腔内的软骨细胞的祖细胞或干细胞，使其繁殖或/和分化成软骨细胞，导致软骨再生，修复软骨损伤；也就是说，利用人体自身的细胞，用蛋白药加以诱导，产生新的软骨细胞和组织，以全面修复软骨损伤；该体系蛋白表达量高，可控性强，生产成本相对较低，且具有良好的生物学活性，容易实现大规模生产。

试验中，以大鼠的膝盖为例，可以先在大鼠的左膝关节腔内注射谷氨酸钠碘乙酸(Monosodium iodoacetate，MIA),破坏软骨，诱导骨关节炎；然后，等待8天后，在大鼠的左膝关节腔内注射含蛋白药的缓冲液，通过测量左、右后腿承重差别来测量左膝关节的疼痛程度，可以发现，在注射含蛋白药的缓冲液后，50天后，软骨逐渐再生，大鼠的左膝左膝关节的疼痛程度趋于平缓，较之起始，疼痛指数从0.35降低至0.21，效果比之镇痛药西乐葆(50天后疼痛指数将为0.28)要好数倍。