[发明专利]液体活检血液中循环肿瘤核酸和细胞的稳定剂及其采血管

权利要求书

1.一种液体活检血液中循环肿瘤核酸和细胞的稳定剂，以重量份计，该稳定剂包括20-100份的防腐剂、5-50份的抗氧化剂、1-35份的抗凝剂、5-20份的pH稳定剂、5-20份的酶抑制剂、0.1-10份的细胞凋亡抑制剂、5-25份的自由基捕获剂和1-10份的代谢抑制剂；

所述防腐剂包括利福平、鱼精蛋白、壳聚糖、果胶分解物、三氯叔丁醇、羧甲纤维素、聚山梨酯、山梨酸、羟苯乙酯和石墨烯纳米抗菌材料中的一种或多种的组合；

所述抗氧化剂包括维生素C、虾青素、类胡萝卜素、特丁基对苯二酚、二丁基羟基甲苯、二叔丁基羟基甲苯和2,3,6,7,10,11-六羟基三苯中的一种或多种的组合；

所述抗凝剂为二乙胺四乙酸钾盐；

所述自由基捕获剂的制备方法包括以下步骤：

以多元胺作为引发剂，加入有机溶剂、催化剂和开环材料，进行开环聚合，得到产物A；

将产物A用乙醚提纯，然后用反向硅胶柱进一步提纯，得到产物B；

将产物B溶于有机溶剂中，加入催化剂和开环材料，进行开环聚合，并采用乙醚和反向硅胶柱依次提纯产物，得到两亲性多臂星形聚合物；

将纳米材料溶于超纯水中超声，然后加入氨水及硅化剂进行硅基化修饰，分离得到产物C，将产物C用氨基酸进行包被，得到产物D；

取产物D、两亲性多臂星形聚合物，加入N-羟基琥珀酰亚胺进行端基修饰反应，得到自由基捕获剂；

所述代谢抑制剂包括氨基葡萄糖盐酸盐和/或金精三羧酸。

2.根据权利要求1所述的稳定剂，其特征在于：所述防腐剂为由利福平、鱼精蛋白、壳聚糖和羟苯乙酯所组成的组合物，其中：利福平、鱼精蛋白、壳聚糖和羟苯乙酯质量比为(1-2)：(3-5)：(2-10)：(5-10)。

3.根据权利要求1所述的稳定剂，其特征在于：所述石墨烯纳米抗菌材料制备方法为：利用水热法培养石墨烯纳米材料，并将1g石墨烯纳米材料溶于50mL超纯水中并超声分散，得到分散液；然后向分散液中加入20g-50g的十八烷基二甲基三甲氧基硅烷基丙基氯化铵，超声震荡48h、水浴5h、搅拌反应10h、过滤、洗涤、干燥得到石墨烯纳米抗菌材料。

4.根据权利要求1所述的稳定剂，其特征在于：所述抗氧化剂为由维生素C、虾青素、类胡萝卜素和特丁基对苯二酚所组成的组合物，其中：维生素C、虾青素、类胡萝卜素和特丁基对苯二酚质量比为(1-5)：(2-5)：(3-10)：(1-5)。

5.根据权利要求1所述的稳定剂，其特征在于：所述pH稳定剂包括Tris-HCl缓冲液和/或柠檬酸。

6.根据权利要求1所述的稳定剂，其特征在于：所述酶抑制剂包括二硫苏糖醇、三(2-羧乙基)膦、巯基乙醇和亚硫酸氢钠中的一种或多种的组合。

7.根据权利要求1所述的稳定剂，其特征在于：所述细胞凋亡抑制剂包括Q-VD-OPh。

8.根据权利要求1所述的稳定剂，其特征在于：所述开环材料包括己内酯、丙交酯、乙烯亚胺、环氧乙烷、谷氨酸和赖氨酸中的一种或多种的组合。

9.根据权利要求1所述的稳定剂，其特征在于：所述催化剂包括辛酸亚锡和/或氯化锌。

10.根据权利要求1所述的稳定剂，其特征在于：所述多元胺包括三乙烯四胺、乙二胺、二乙烯三胺和四亚乙基五胺中的一种或多种的组合。

11.根据权利要求1所述的稳定剂，其特征在于：所述有机溶剂包括二氯甲烷或二甲基亚砜。

12.根据权利要求1所述的稳定剂，其特征在于：所述氨基酸包括赖氨酸、丝氨酸和异亮氨酸中的一种或多种的组合。