[发明专利]一种夹心式免疫传感器的制备方法

说明书

本发明公开了一种基于无规共聚物与氧化石墨烯复合用于构建电化学免疫传感器的制备方法，其特征是将丙烯酸和甲基丙烯酸酯类单体，通过加入链转移剂形成分子量可控的含有大量功能基团的无规共聚物，连接信号分子后制备成用于信号放大的探针，将其负载到石墨烯等载体上形成复合物，借助本发明所构建的电化学免疫传感器成功实现了癌胚抗原检测信号的指数级放大，最低检测限为0.17皮克/毫升。

技术领域

本发明涉及一种电化学免疫传感器的制备方法，具体是一种基于无规共聚物与氧化石墨烯复合用于构建电化学免疫传感器的制备方法，属于新型纳米功能材料和电化学免疫传感器技术领域。

背景技术

多年来，癌症一直是威胁人类身体健康及生命安全的重大疾病，随着工业化的不断发展，世界卫生组织预测21世纪恶性肿瘤将成为人类的“第一杀手”，故癌症控制已经成为全球性的医疗卫生战略重点。虽然恶性肿瘤的治疗技术在不断的进步，但迄今为止，早期发现，诊断和治疗仍然是攻克癌症最有效的手段。在现阶段传统的肿瘤标志物的检测手段，如酶联免疫法、荧光免疫法等都存在检测时间长、灵敏度低、光污染等危害，由于抗体和抗原之间的高选择性，电化学免疫传感器在肿瘤标志物的早期检测中作为一种有效的分析方法被广泛使用。

无规共聚是一种操作简单，效率高的合成大分子链聚合物的方法，通过加入链转移剂形成分子量可控的含有大量功能基团的无规共聚物，并在其功能基团上加载大量的电化学标记蒽醌二羧酸，制备成用于信号放大的探针，而后将其负载到石墨烯等载体上形成复合物，将使信号输出呈现出指数级增长。

通过此种方法简单快捷的制备的复合物用于构建电化学免疫传感器并应用于对肿瘤标志物的超灵敏度检测中，并将其与其诊断方法相结合，无疑会大大提高肿瘤早期诊断率。

发明内容

本发明目的是提供构建电化学免疫传感器的方法。

本发明提供了一种夹心式免疫传感器的制备方法，所用单体为甲基丙烯酸酯类和丙烯酸，采用偶氮类引发剂或过硫酸盐类引发剂，所用链转移剂为二硫代萘甲酸异丁腈酯,将上述单体、引发剂和链转移剂通过溶液聚合的方式获得无规共聚物后，在其功能基团上加载大量的电化学标记蒽醌二羧酸，制备成用于信号放大的探针，而后将其负载到石墨烯载体上形成复合物；

其中甲基丙烯酸酯类和丙烯酸的摩尔比为100:1～1:1，甲基丙烯酸酯类与链转移剂的摩尔比为300:1；

将复合物应用于夹心式免疫传感器的构建，使所组建的夹心式免疫传感器对肿瘤标志物的检测实现信号值的指数级放大，最低检测限为0.17皮克/毫升。

本发明与已有技术相比具有以下优点：本发明提供的无规共聚物与氧化石墨烯复合后获得复合物上可负载有大量的化学标记蒽醌二羧酸，所得复合物应用于电化学免疫传感的构建，可使所组建的夹心式免疫传感器成功对肿瘤标志物的检测实现了信号值的指数级放大，其最低检测限可达到0.17皮克/毫升。

具体实施方式：

下面详细说明本发明并给出几个实施例：

实施例一：

将2.0毫升甲基丙烯酸羟乙酯、1.13毫升丙烯酸、0.0143克二硫代萘甲酸异丁腈酯、0.0154克偶氮二异氰基戊酸加入到装有2.0毫升N,N-二甲基甲酰胺的安瓿瓶中，进行液下通氮气处理7～10分钟，将安瓿瓶口火焰密封后，置于60摄氏度条件下反应2小时，产物达到粘稠的状态，取出后用1毫升N,N-二甲基甲酰胺充分溶解后，产物经冷却，透析，冷冻干燥后得到最终无规共聚物。所得到的聚合物首先负载上大量的化学标记蒽醌二羧酸，而后与氧化石墨烯构筑的复合物应用于肿瘤标志物的超灵敏度检测，其最低检测限为0.17皮克/毫升。

实施例二：