[发明专利]一种防治矮牵牛病毒病的方法

权利要求书

1.一种防治矮牵牛病毒病的方法，其特征在于：该方法按以下步骤进行：

1)、培养基的配制，包括基本培养基和组培各阶段培养基的各组分与每升所含重量为：

基本培养基；

(2)诱导培养基；

(3)增殖培养基；

(4)生根培养基；

2)、矮牵牛茎尖脱毒培养：

(1)外植体的选取与灭菌；

(2)茎尖脱毒培养；

(3)增殖培养；

(4)壮苗培养；

(5)生根培养；

(6)移栽；

(7)定植；

3)、病毒ELISA检测：

将常规温室中发生的矮牵牛病毒，经扩增、克隆和原核表达所获得的相关病毒外壳蛋白，注射小鼠或家兔免疫并制备成病毒特异性抗缸清后，对移栽苗和开花植株进行病毒ELIsA检测；

4)、弱病毒的接种

将黄瓜花叶病毒的弱病毒株通过常规汁液摩擦方法接种到步骤3)检测为无病毒的矮牵牛植株上：

5)、弱病毒植株的组培繁殖：

(1)外植体的选取与灭菌：取步骤4)检测为弱病毒的矮牵牛植株上的幼芽，经灭菌处理后作为组培繁殖用的外植体；

(2)诱导培养：将灭菌处理后的幼芽接种在诱导培养基上，在培养条件下培养30～45天后，诱导形成丛生芽；

(3)增殖培养：将诱导形成的丛生芽切成单芽接到增殖培养基上，在培养条件下培养30～45天增殖出丛生芽；根据对幼苗数量的需求，每隔30～45天按同样方法进行幼苗再增殖培养；

(4)壮苗培养：将增殖出的丛生芽接种到壮苗培养基上，在培养条件下培养20～30天后，幼苗株高生长达2～5厘米；

(5)生根培养：将培养的壮苗切成单株接种在生根培养基中进行生根培养，在培养条件下培养20～30天后，幼苗长高成约5～7cm、苗基部长出5～10根细根；

(6)移栽：将生根组培苗移栽于基质中，培育1～2个月至成苗；

(7)定植：将移栽苗定植在盆钵中，培育3～5个月至植株。