[发明专利]幽门螺杆菌胶体金分型检测试纸条及试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及医学生物技术领域，具体涉及一种致病菌的检测方法，特别涉及致病性幽门螺杆菌的胶体金分型检测试纸条。

背景技术

现已证实幽门螺杆菌是导致胃溃疡、胃癌等严重消化道疾病的重要致病因素。目前幽门螺杆菌感染率已经达到50％左右。但因为幽门螺杆菌致病性不一致(分为低毒型和高毒型)，并不是所有的幽门螺杆菌感染均需要进行治疗。故诊断出是否被幽门螺杆菌感染以及被何种幽门螺杆菌感染对临床治疗具有重要的指导意义。当前，诊断幽门螺杆菌感染的方法大致分为侵入性和非侵入性两类。

1侵入性：

1)经胃镜取胃粘膜做幽门螺杆菌培养：尽管幽门螺杆菌培养法最为可靠，视为幽门螺杆菌诊断的金标准，但敏感性不高。加上幽门螺杆菌是微需氧菌，培养需要一定的设备，故一般医院不适其为常规。

2)快速尿素酶和组织学检查：两者的联合应用，大大提高了诊断幽门螺杆菌的阳性率，但仅仅能够判断是否由于幽门螺杆菌感染，不能进一步进行分型。检测结果受取材部位，组织块大小，细菌量，检测试剂pH值，观察时间，环境温度等因素影响。组织学检测耗时长，免疫组织化学费用高。

2非侵入性：

1)细菌培养：复杂，耗时，需要一定实验条件，标本转送培养需专门的转送液并低温保存。

2)血清抗幽门螺杆菌抗体检测：检测的抗体是IgG，阳性仅表明过去或现在感染幽门螺杆菌，幽门螺杆菌根除后血清抗体尤其是细胞毒Cag/A抗体可以维持很久，长达数年，因此该结果不能及时判断幽门螺杆菌治疗后的情况。

3)碳13/碳14呼气试验：敏感性、特异性虽高，但是碳13呼气试验使用了稳定性同位素，检测需要特殊的质谱仪检测，耗时长，费用高，基层医院不适宜推广碳14呼气试验对人体有放射性，孕妇和小儿慎用。此外，这种呼气试验当检测值处于临界值附近时，结果不可靠。另外，以上方法皆不能分型。

可见，现有的主流检测幽门螺杆菌技术尚停留在通过尿素酶试验检测有无幽门螺杆菌感染水平，分型产品欠缺。

为解决上述技术问题，本发明由此而来。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是克服现有技术中检测幽门螺杆菌技术的缺陷，提供一种简便、高效可以分型检测幽门螺杆菌致病基因的试纸条其试剂盒。

为解决上述问题，本发明第一方面提供的技术方案是:一种幽门螺杆菌的胶体金分型检测试纸条，所述试纸条包括支撑板，在所述支撑板的表面从加样端依次排列的样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜和吸收垫这四个部件，所述金标垫上包含胶体金标记抗人IgG的Fc段单抗；所述硝酸纤维素膜上设有包被有HP细胞毒(CagA)抗原、HP空泡毒(VacA)抗原、HP尿素酶亚单位A蛋白抗原和HP尿素酶亚单位B蛋白抗原的四条检测线和质控线，且上述的四条检测线及质控线相互都不重合。且优选，这四条检测线和质控线相互平行。

优选地，所述硝酸纤维素膜上设有的四条检测线距离加样端较近一侧，质控线距离加样端较远一侧。

优选地，所述质控线上包被有兔抗鼠IgG抗体。

优选地，所述HP细胞毒(CagA)抗原对应的基因序列为Seq ID No.1。

优选地，所述HP空泡毒(VacA)抗原对应的基因序列为Seq ID No.2。

优选地，所述HP尿素酶亚单位A蛋白抗原对应的基因序列为Seq ID No.3。

优选地，所述HP尿素酶亚单位B蛋白抗原对应的基因序列为Seq ID No.4。

优选地，所述所述硝酸纤维素膜上设置的四条检测线从加样端依次排列为：包被有HP细胞毒(CagA)抗原的检测线、包被有HP空泡毒(VacA)抗原的检测线、包被有HP尿素酶亚单位B蛋白抗原的检测线和包被有HP尿素酶亚单位A蛋白抗原的检测线。且各个检测线之间间距为3～8mm；最后一条检测线和质控线的间距为3～10mm。

优选地，样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜和吸收垫这四个部件，相邻两部件间边缘重叠。

金标垫表面涂布或嵌有牛血清白蛋白、吐温20和蔗糖；样品垫表面涂布或嵌有牛血清白蛋白、吐温20和蔗糖。其中，在表面上涂布或嵌有可以采用浸泡后再干燥来进行。优选，浸泡在2％牛血清白蛋白(BSA)、l％Tween-20、2.5％蔗糖、0.05％NaN3、0.01MpH7.2PB溶液中。

本发明还提供一种幽门螺杆菌的胶体金分型检测试盒，其保护有上述的幽门螺杆菌的胶体金分型检测试纸条。