[发明专利]一种抑制肿瘤的短肽及其编码基因与应用

说明书

本发明公开了一种抑制肿瘤细胞生长的短肽及其编码基因与应用。本发明的短肽的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。本发明提供的短肽能够抑制子宫颈癌细胞（HeLa）的生长，因此该短肽可能成为良好的低副作用的抗癌药物。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种抑制肿瘤的短肽及其编码基因与应用。

背景技术

在全球范围内，癌症都有着较高的发病率和致死率。近几十年来，人类为治疗癌症付出了不懈的努力，对癌症的研究主要集中在开发新的治疗方法和减轻治疗方法对病人的副作用。现在常用的治疗癌症的方法主要是手术或者化疗，但是很多情况下不仅不能高效的治疗病人，并且还具有很高的并发症的风险，一些治疗癌症的药物不仅有多种副作用，而且还可能会引起多重耐药。

抗肿瘤肽作为一种新型的治疗癌症的药物，因为它具有对肿瘤细胞有选择性，不易引起耐药性等特点，正越来越受到人们的关注。

许多抗肿瘤肽是从自然界生物内获得的。这种直接来源于生物体内的抗肿瘤肽一般肽链较长，很难用化学法合成，难以纯化，且具有结构不稳定，易失活等缺点。

发明内容

本发明人对自然界生物内的多种天然多肽进行特异性选择和改变，通过大量的实验，最终获得了一种能够抑制肿瘤细胞生长且结构稳定不易失活的短肽，其仅由15个氨基酸组成，容易用化学法合成，具体氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示（Arg-Ile-Arg-Asp-Ala-Ile-Ala-His-Gly-Tyr-Ile-Val-Asp-Lys-Val）。该短肽来源于凡纳滨对虾血蓝蛋白，一般认为血蓝蛋白的主要生物学功能与机体内的输氧有关。虽然近年来有研究发现血蓝蛋白有一定的抗肿瘤活性，但是凡纳滨对虾血蓝蛋白分子量为75KD左右，包括662个氨基酸，难以用化学法合成，而且在体外结构不稳定，易失活。本申请发明人选择地缩短了该蛋白的肽链长度并进行了多次优化和实验，最终得到了本发明的抗肿瘤短肽。本发明抗肿瘤短肽具有广谱性，对多种癌细胞具有抑制和杀伤作用，肽链长度短，抗肿瘤活性高，而且稳定不易失活

本发明还提供了上述抗肿瘤短肽的编码基因。

本发明还提供了上述编码基因的表达盒。

本发明还提供了上述编码基因的重组菌。

本发明还提供了上述编码基因的重组载体。

本发明还提供了上述编码基因的转基因细胞系。

本发明还提供了上述多肽、编码基因、重组载体或转基因细胞系在制备抑制肿瘤的制剂中的用途。

作为对上述用途技术方案的进一步限定，所述肿瘤为宫颈癌。

本发明还提供了一种用于治疗肿瘤的制剂，其含有上述多肽、编码基因、重组载体或转基因细胞系。

作为对上述制剂技术方案的进一步限定，所述肿瘤为宫颈癌。

本发明的抗肿瘤短肽可以采用本领域技术人员已知的方法合成，例如固相合成，并采用本领域技术人员已知的方法进行纯化，例如高效液相色谱法。本发明的抗肿瘤短肽具有广谱性，对多种癌细胞具有抑制和杀伤作用，不仅抗肿瘤活性更高，而且稳定不易失活。

附图说明

图1为本发明抑制肿瘤的短肽的高效液相色谱图。

图2为本发明抑制肿瘤的短肽的的质谱图。

图3为本发明抑制肿瘤的短肽和血蓝蛋白中其他短肽片段的抗肿瘤活性比较。

图4为本发明抑制肿瘤的短肽和血蓝蛋白的抗肿瘤活性比较。

图5为本发明抑制肿瘤的短肽对肿瘤细胞形态的影响。

图6为本发明抑制肿瘤的短肽诱导肿瘤细胞凋亡。