[发明专利]人血浆中泮托拉唑的手性LC‑MS/MS高通量检测方法

权利要求书

1.一种人血浆中泮托拉唑的手性LC-MS/MS高通量检测方法，其特征在于：包括以下步骤：

S1、血浆样品前处理：取50.0μL血浆，加入500μL内标溶液作为蛋白质沉淀剂，涡流并离心后，取上清液，得到待测样品；

S2、LC-MS/MS分析条件：

I.LC条件：Lux cellulose-4柱：250mm×4.6m，5μm；柱温：40℃；进样体积：2μL；流动相A：10mM醋酸铵水溶液；流动相B：乙腈，采用体积比为10：90的A：B相等梯度洗脱，流动相的流速为1.3mL/min；

II.MS条件：离子源：大气压化学电离源APCI；雾化电流：3.0μA；离子源温度：550℃；离子源气体N₂：55psi，气帘气体N₂：40psi；扫描模式：正离子多反应监测+MRM；

S3、标准曲线的绘制：称取S-(-)-泮托拉唑以甲醇溶解并定容，配制成S-(-)-泮托拉唑浓度约为1.00mg/mL的贮备液，称取R-(+)-泮托拉唑以甲醇溶解并定容，配制成R-(+)-泮托拉唑浓度约为1.00mg/mL的贮备液，吸取贮备液并以人空白血浆逐级稀释得到混合标准系列样品，以上述LC-MS-MS条件分别检测所述标准液，并根据检测结果绘制相应的标准曲线。

2.根据权利要求1所述的人血浆中泮托拉唑的手性LC-MS/MS高通量检测方法，其特征在于：所述步骤S1中涡流的时间均为2min，涡流转速为4500rpm。

3.根据权利要求1所述的人血浆中泮托拉唑的手性LC-MS/MS高通量检测方法，其特征在于：所述步骤S1中所述内标溶液为分别用S-(-)-泮托拉唑-D6和R-(+)-泮托拉唑-D6标准品以甲醇溶解并定容配制内标浓度为0.8mg/mL的内标贮备液，精密吸取上述各内标贮备液适量，加乙腈稀释，获得S-(-)-泮托拉唑-D6和R-(+)-泮托拉唑-D6的浓度均为50.0ng/mL的混合内标溶液。

4.根据权利要求1所述的人血浆中泮托拉唑的手性LC-MS/MS高通量检测方法，其特征在于：所述步骤S2中色谱柱的洗脱时间为5.5min。

5.根据权利要求1所述的人血浆中泮托拉唑的手性LC-MS/MS高通量检测方法，其特征在于：所述步骤S2采用柱后分流，将色谱柱后流出的流动相分流为第一流动相和第二流动相，第一流动相以0.4mL/min的流速进入质谱，第二流动相以0.9mL/min的流速进入排废管路。

6.根据权利要求1所述的人血浆中泮托拉唑的手性LC-MS/MS高通量检测方法，其特征在于：所述步骤S2中的LC条件还包括自动进样器温度为室温。

7.根据权利要求1所述的人血浆中泮托拉唑的手性LC-MS/MS高通量检测方法，其特征在于：所述步骤S2中正离子多反应监测的S-(-)-泮托拉唑和R-(+)-泮托拉唑经APCI电离后产生前体离子的m/z为384.1，主要碎片离子为m/z 200.1，S-(-)-泮托拉唑-D6和R-(+)-泮托拉唑-D6产生的前体离子为m/z390.2，主要碎片离子为m/z 206.1，碰撞能量均为18eV。

8.根据权利要求1所述的人血浆中泮托拉唑的手性LC-MS/MS高通量检测方法，其特征在于：所述步骤S3中混合标准系列样品空白血浆中S-(-)-泮托拉唑和R-(+)-泮托拉唑的浓度范围均为0.0150-15.0μg/mL。