[发明专利]一种莲藕酚类化合物指纹图谱的构建方法

权利要求书

1.一种莲藕酚类化合物指纹图谱的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：

1)莲藕洗净后切分为藕段和藕节，藕段刨取皮部，藕节切除须根，得到藕皮和藕节两种供试部位，分别粉碎至5-20目待用；

2)将步骤1)中粉碎的藕皮和藕节分别进行酚类化合物浸提处理，得藕皮酚类化合物供试液和藕节酚类化合物供试液；

3)以步骤2)得到的藕皮酚类化合物供试液和藕节酚类化合物供试液为试样，分别进行高效液体色谱检测，得藕皮酚类化合物指纹图谱和藕节酚类化合物指纹图谱；

4)重复步骤1)、2)和3)分别得到多个不同品种莲藕的藕皮和藕节相应的酚类化合物指纹图谱，通过Chempattern软件进行指纹图谱的比对分析，分别确定8个共有峰，并以共有峰分别建立藕皮酚类化合物标准指纹图谱和藕节酚类化合物标准指纹图谱。

2.根据权利要求1所述的一种莲藕酚类化合物指纹图谱的构建方法，其特征在于，步骤1)中藕皮的厚度为0.8-1.2mm。

3.根据权利要求1所述的一种莲藕酚类化合物指纹图谱的构建方法，其特征在于，步骤2)中的酚类化合物浸提处理的具体内容为：按1g:8～12mL的料液比将步骤1)中粉碎的供试部位加入预冷至4℃的浸提液中，在8000～12000r/min的转速下均质处理3～5min，匀浆经10000r/min离心5min，固液分离得一次提取液和残渣，残渣以1g:8～12mL的料液比加入预冷至4℃的浸提液，在6000～8000r/min的转速下均质处理3～5min，匀浆经10000r/min离心5min，固液分离得二次提取液和残渣；合并一次提取液和二次提取液，在50℃水浴下真空浓缩至约10mL，全部转移至25mL容量瓶中并用甲醇定容，采用0.45μm针头过滤器过滤后得到相应的酚类化合物供试液。

4.根据权利要求3所述的一种莲藕酚类化合物指纹图谱的构建方法，其特征在于，所述浸提液为甲醇、甲酸和水的混合液，混合液中甲醇的浓度为80wt％，甲酸的浓度为2wt％。

5.根据权利要求1所述的一种莲藕酚类化合物指纹图谱的构建方法，其特征在于，步骤3)中的高效液相色谱的检测条件为：色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填料，规格为250×4.6mm，粒径为5μm，柱温为30℃；检测波长为280nm；流动相A为乙腈，流动相B为体积分数0.4％的乙酸溶液，梯度洗脱时间0min→30min→40min→55min→65min对应的流动相A/B体积比为5：95→25:75→50:50→5:95→5:95，流速为1.0mL/min；进样体积为20μL。

6.根据权利要求1至5任一项所述的一种莲藕酚类化合物指纹图谱的构建方法，其特征在于，步骤4)中通过Chempattern软件确定藕皮酚类化合物标准指纹图谱和藕节酚类化合物标准指纹图谱时，均以最小共有峰值在5％以上确定8个共有特征峰。

7.根据权利要求6所述的一种莲藕酚类化合物指纹图谱的构建方法，其特征在于，步骤4)中的多个不同品种莲藕的数量为12个以上。