[发明专利]氧化石墨烯铂纳米复合材料为探针的谷胱甘肽检测试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及以氧化石墨烯铂纳米复合材料为探针的谷胱甘肽检测试剂盒，属于分析化学及纳米技术领域。

背景技术

谷胱甘肽（ʟ-γ-谷氨酰-ʟ-半胱氨酰甘氨酸，GSH）是由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸组成的三肽。它是哺乳动物组织中最丰富的非蛋白质巯基生物分子，并参与多种生理过程，如代谢和抗氧化防御。细胞内GSH浓度范围在1至10 mmol/L。在正常生理情况下，谷胱甘肽还原酶可以维持谷胱甘肽的量比它的氧化形式的量高200～800倍。然而，当细胞受到的氧化压力增加时，更多的谷胱甘肽转化为其氧化态，导致细胞内GSH水平下降，引起许多疾病的发生和发展。相反，GSH升高通常出现于各种癌细胞，可产生氧化应激抵抗效应。由于GSH广泛参与各种生物学功能，因此建立有效的方法在生理条件下检测GSH具有重要的意义。

催化活性纳米材料因其性能稳定、催化活性可调、催化效率高、成本低廉等优点，可作为天然酶的有效替代品，并广泛应用于生物医学和环境化学等。其中，基于组件特性组合的协同增强性能的复合纳米材料更是受到了广泛的关注。

本发明以氧化石墨烯铂纳米复合材料作为仿生催化探针，基于氧化石墨烯铂纳米复合材料良好的模拟过氧化物酶活性，结合谷胱甘肽对氧化石墨烯铂纳米复合材料催化体系的作用，用于谷胱甘肽的检测，提供了一种简便、灵敏的谷胱甘肽检测试剂盒。

发明内容

本发明的目的是提供一种以氧化石墨烯铂纳米复合材料作为仿生催化探针的谷胱甘肽检测试剂盒。试剂盒中包括提供氧化石墨烯铂纳米复合材料溶液（a液），3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐过氧化氢溶液（b液）和谷胱甘肽溶液（标准贮备液）。

为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

本发明所述的一种基于氧化石墨烯铂纳米复合材料作为仿生催化探针的谷胱甘肽检测试剂盒，其特征是试剂盒中有氧化石墨烯铂纳米复合材料溶液，3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐过氧化氢溶液和谷胱甘肽溶液，所述的氧化石墨烯铂纳米复合材料溶液作为a液，3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐过氧化氢溶液作为b液，谷胱甘肽溶液为标准贮备液；所述的氧化石墨烯铂纳米复合材料由以下方法制备：往9.225 mL浓度为2 mg/mL的氧化石墨烯溶液中加入0.575 mL浓度为10 mg/mL的氯铂酸水溶液，混匀剧烈搅拌15 min后，逐滴加入0.2 mL浓度为5 mg/mL的硼氢化钠水溶液，磁力搅拌4小时后即得，将得到的反应产物冷冻干燥得到氧化石墨烯铂纳米复合材料。

所述的基于氧化石墨烯铂纳米复合材料作为仿生催化探针的谷胱甘肽检测试剂盒，其特征是a液为用双蒸水配制，浓度为11.5 mg/L的氧化石墨烯铂纳米复合材料溶液；b液为用10 mmol/L，pH=5磷酸盐缓冲溶液配制的含浓度为26.7 mmol/L的过氧化氢和浓度为0.13 mmol/L 3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐溶液；标准贮备液为浓度为0.4 mmol/L的谷胱甘肽溶液。

所述的基于氧化石墨烯铂纳米复合材料作为仿生催化探针的谷胱甘肽检测试剂盒，其特征是吸光度测定波长为652 nm。

所述的基于氧化石墨烯铂纳米复合材料作为仿生催化探针的谷胱甘肽检测试剂盒，其特征是谷胱甘肽测定的线性范围为0.02~20 μmol/L，检测限为4 nmol/L。

本发明所述的一种基于氧化石墨烯铂纳米复合材料作为仿生催化探针的谷胱甘肽检测试剂盒测定谷胱甘肽的方法，其特征是将谷胱甘肽标准贮备液用双蒸水稀释为0.004、0.04、0.1、0.2、0.3、0.4 mmol/L的系列标准溶液，在200 μL双蒸水和上述系列标准溶液中分别加入50 μL a液和3.75 mL b液，充分混匀后置于30 °C水浴反应5分钟，测定652 nm波长处的吸光度值，双蒸水对照组的吸光度为A₀，谷胱甘肽测定组的吸光度为A，以A₀/A对谷胱甘肽浓度作图绘制谷胱甘肽标准曲线或计算回归方程。

所述的基于氧化石墨烯铂纳米复合材料作为仿生催化探针的谷胱甘肽检测试剂盒测定谷胱甘肽的方法，其特征是a液为用双蒸水配制，浓度为11.5 mg/L的氧化石墨烯铂纳米复合材料溶液；b液为用10 mmol/L，pH=5磷酸盐缓冲溶液配制的含浓度为26.7 mmol/L的过氧化氢和浓度为0.13 mmol/L 3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐溶液。