[发明专利]一种HOCs的被动加标方法及其在效应导向分析中的应用

说明书

本发明公开了一种HOCs的被动加标方法及其在效应导向分析中的应用,包括以下步骤：步骤一，PDMS膜的制备；步骤二，被动加标载样；步骤三，效应导向分析；步骤四，毒性组分中有机污染物的定性与定量分析；步骤五，毒性确认。本发明基于平衡分配原理，使载入聚合物PDMS的HOCs不断释放进入水体，弥补水体中HOCs随时间的损耗，能够有效维持相对恒定的HOCs水浓度，有效克服常规溶剂加标方法在HOCs水毒性测试中浓度不稳定的问题，同时考虑HOCs的生物可利用性；在效应导向分析中，可提供更为准确的生物毒性测试数据。

技术领域

本发明涉及一种HOCs的被动加标方法及其在效应导向分析中的应用，属于有机污染物毒性测定技术领域。

背景技术

水污染严重威胁水生生态系统平衡和人类健康，亟需开展水生生态风险评价的研究，制定相应的水质基准；准确可靠的毒性数据是建立有效水质基准的前提，而毒性数据主要通过加标目标污染物到水体，利用模式生物进行毒性测试来获取。

传统的溶剂加标方法将待测化合物配制成目标浓度的有机溶液，然后加入水体；对于疏水性有机污染物(hydrophobic organic contaminants,HOCs)，由于其挥发降解、容器壁吸附、毒性测试中生物体的摄取等因素，毒性测试过程中污染物水体浓度逐渐降低。这导致水体暴露浓度变化大，污染物的剂量-效应关系不明，直接影响毒性测试数据的准确性。

另外，环境污染因素复杂，多种污染物共存，鉴定主要致毒物是关键也是难点；效应导向分析(effect-directed analysis,EDA)结合化学分离分析方法和生物毒性测试技术，以有机污染物为筛选对象，可确定主要毒性贡献者；针对当前HOCs污染严重、对水生生物毒性强的特点，有必要发展并完善EDA在毒性鉴定评价中的方法，发展能够有效维持毒性测试过程中HOCs水浓度，同时考虑污染物生物可利用性的加标方法是有效开展EDA的基础。

本发明以聚二甲基硅氧烷(polydimethylsiloxane,PDMS)为聚合物，HOCs为目标污染物，水为测试介质，烧杯为测试体系；基于平衡分配理论，使提前载入聚合物的HOCs不断释放进入水体，弥补水体中HOCs随时间的损耗，有效克服溶剂加标方法在HOCs水毒性测试中浓度不稳定的问题，并考虑毒性测试中污染物的生物可利用性。

发明内容

为解决上述问题，本发明提出了一种HOCs的被动加标方法及其在效应导向分析中的应用，能够有效维持相对恒定的HOCs水浓度，同时考虑HOCs的生物可利用性，为开展EDA中生物毒性测试提供保障。

本发明的HOCs的被动加标方法及其在效应导向分析中的应用，包括以下步骤：

步骤一，PDMS膜的制备，

第一步，将硅酮前聚物和固化剂充分混合，以一定厚度均匀涂布在干净的不锈钢板上，涂布厚度为0.1～0.5mm，去除其中气泡，保持710mm汞柱30～40min；

第二步，23～25℃固化72～96h后，将膜揭下，裁剪成一定大小的片状；

第三步，用丙酮超声3～4次去除杂质，超声时间为15～30min；

第四步，用纯净水超声3～4次去除丙酮，自然风干，得到PDMS膜，所得PDMS膜的密度为1.15～1.20g/ml；

步骤二，被动加标载样，

第一步，取一片步骤一制备的空白PDMS膜浸泡于含有目标HOCs的甲醇溶液，在23～25℃水平摇动，控制水平摇动速率为200～220rpm，每隔一段时间加入纯净水，至少加8次，促使HOCs转移到PDMS膜中，至48～72h完成载样；

第二步，取出PDMS膜，用纯净水洗净甲醇，在23～25℃自然风干，得到载样PDMS膜；

步骤三，效应导向分析，