[发明专利]一种鸭特异性CpG寡脱氧核苷酸及其应用

说明书

本发明针对目前预防和控制鸭病毒病，尤其是鸭坦布苏病毒的发生和流行的药物缺乏等问题，提供了一种起效快、作用范围广、可抑制鸭坦布苏病毒（DTMUV）的鸭特异性CpG寡脱氧核苷酸（CpG ODN），以GACGTT为重复基序。本发明的鸭特异性CpG ODN比已知的鸭特异性CpG ODN活性更强，能够有效抑制鸭坦布苏病毒的复制，体外抑制率可达95%左右，为鸭坦布苏病毒及其他鸭源病毒性疫病的治疗提供了新的手段和依据。

技术领域

本发明涉及一种鸭特异性CpG ODN及其在制备鸭病毒病治疗药物中的应用，属于兽医药领域。

背景技术

近年，鸭坦布苏病毒（DTMUV）、禽流感、鸭瘟等鸭病毒病严重危害养鸭产业，给我国养鸭业造成了巨大的经济损失。疫苗是预防和控制病毒性疫病强有力的手段，但在实际生产中，时常会出现免疫失败或者在疫苗提供有效保护前就已发生感染的情况。所以迫切需要既能提高机体免疫力抑制病毒复制又能增强疫苗免疫效果的药物来预防和控制鸭病毒性传染病的发生和流行。

CpG寡脱氧核苷酸（CpG oligonucleotide，CpG ODN），是指含有非甲基化胞嘧啶(C)和鸟嘌呤(G)二核苷酸为核心序列的DNA或寡脱氧核苷酸序列，其基序为5′-RD-CpG-YY-3′，是DNA具备免疫刺激活性的结构基础。CpG ODN被机体Toll样受体（Toll-likereceptors，TLR）识别后能够快速激活多种免疫细胞，作为免疫增强剂已得到广泛验证和应用。CpG ODN在激活先天性免疫、增强疫苗免疫效果、治疗变态反应等方面均显示出较广阔的应用前景。

CpG ODN的免疫刺激作用具有种属特异性，小鼠最佳刺激活性的基序是5’-GACGTT-3’，而人和鸡的最佳刺激活性基序为5’GTCGTT3’。鸭的CpG ODN研究较少，已有的研究表明，含5’-GTCGTT-3’基序的分子也可有效刺激鸭免疫反应的产生，但5’-GACGTT-3’基序的活性更强。除种属特异性外，CpG ODN存在构效关系，即结构影响活性，骨架结构（含CpG基序的数量及位置）、侧翼序列、末端poly G修饰、连接序列均为分子活性的影响因素。目前，尚未见相关有效抑制病毒复制的鸭种属特异性CpG ODN的研究。

发明内容

针对目前预防和控制鸭病毒病发生和流行的药物缺乏等问题，本发明提供一种起效快、作用范围广、可增强疫苗免疫效果的鸭特异性CpG寡脱氧核苷酸（CpG ODN）。

本发明的另一目的是提供一种上述鸭特异性CpG ODN在制备治疗鸭病毒病药物中的应用。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案。

一种鸭特异性CpG寡脱氧核苷酸（CpG ODN），包含GACGTT基序且含有8-24个核苷酸。

所述鸭特异性CpG ODN包括1-4个重复GACGTT基序，优选为3个重复。

所述鸭特异性CpG ODN重复基序之间无连接序列。

所述鸭特异性CpG ODN中的磷酸二酯键部分或全部被硫代磷酸酯键取代。

所述鸭特异性CpG-ODN的GACGTT基序不位于所述鸭特异性CpG ODN的5’端。

作为优选，所述鸭特异性CpG-ODN为SEQ ID NO. 1所示的核苷酸序列。

一种上述鸭特异性CpG ODN在制备治疗鸭病毒病药物中的应用。

上述治疗鸭病毒病药物为治疗鸭坦布苏病毒的药物。

本发明具有以下优点：

本发明合成的鸭种属特异性CpG ODN活性序列，比已知鸭特异性CpG ODN活性更强，能够有效抑制鸭坦布苏病毒的复制，体外抑制率可达95%左右，为DTMUV及其他鸭源病毒性疫病的治疗提供了新的手段和依据。