[发明专利]快速提取冬虫夏草菌基因组DNA的方法

权利要求书

1.快速提取冬虫夏草菌基因组DNA的方法，其特征在于，包括以下步骤：

a、冬虫夏草菌菌体培养与收集

将冬虫夏草菌菌种接种于培养基中，培养10～20d后，过滤，收集菌丝沉淀；

b、冬虫夏草菌基因组DNA的提取

取步骤a所得菌丝沉淀，加入蒸馏水，打碎菌体，离心后弃上清；加入磷酸氢二钾溶液，离心弃上清；再加入磷酸氢二钾震荡成均匀悬浮的菌液，加入混合酶液，混合酶液为蜗牛酶和纤维素酶的混合液，所述的混合酶液中每毫升含蜗牛酶1～10mg，含纤维素酶1～10mg，混合酶液的加入量为每0.5～1g菌丝沉淀中加入1～10ml，震荡混匀0.5～3h，煮沸5～30min，再于冰上放置5～30min，离心，上清即为冬虫夏草菌基因组DNA。

2.根据权利要求1所述的快速提取冬虫夏草菌基因组DNA的方法，其特征在于：步骤a中所述的培养基组成为：每升培养基中含马铃薯80～300g，葡萄糖20～50g，蛋白胨5～20g，酵母提取物1～10g，磷酸氢二钾0.1～5g，硫酸镁0.1～5g，余量为水。

3.根据权利要求1所述的快速提取冬虫夏草菌基因组DNA的方法，其特征在于：步骤a中所述培养的培养温度为10～25℃，培养时置于转速为100～250r/min震荡摇床中进行。

4.根据权利要求1所述的快速提取冬虫夏草菌基因组DNA的方法，其特征在于：步骤b中所述的离心是指在6000～10000r/min离心5～10min。

5.根据权利要求1所述的快速提取冬虫夏草菌基因组DNA的方法，其特征在于：步骤b中所述蒸馏水加入量为每0.5～1g菌丝沉淀中加入蒸馏水2～10ml。

6.根据权利要求1所述的快速提取冬虫夏草菌基因组DNA的方法，其特征在于：步骤b中所述的磷酸氢二钾溶液浓度为0.01～0.1mol/L，加入量为每0.5～1g菌丝沉淀中加入2～10ml。

7.根据权利要求1所述的快速提取冬虫夏草菌基因组DNA的方法，其特征在于：步骤b中所述震荡混匀时转速为100～250r/min，温度为25～37℃。