[发明专利]一种从富SOD植物(黑小麦、米油糠粉)中生物发酵后提取SOD精酶的方法

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种从富SOD植物(黑小麦、米油糠粉等植物)中生物发酵后提取SOD精酶的方法。

背景技术

SOD是Super Oxide Dismutase缩写，中文名称超氧化物歧化酶，是生物体内重要的抗氧化酶，广泛分布于各种生物体内，如动物，植物，微生物等。SOD具有特殊的生理活性，是生物体内清除自由基的首要物质。SOD在生物体内的水平高低意味着衰老与死亡的直观指标；现已证实，由氧自由基引发的疾病多达60多种。它可对抗与阻断因氧自由基对细胞造成的损害，并及时修复受损细胞，复原因自由基造成的对细胞伤害。由于现代生活压力，环境污染，各种辐射和超量运动都会造成氧自由基大量形成；因此，生物抗氧化机制中SOD的地位更引起了人们的重视。

然而现有技术中SOD酶广泛的存在于动植物界，都不耐高温(40℃以上)，且易被人体胃肠的酸碱破坏，再则sod含量也低，而且人的用量不可控制，无法量化。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种从富SOD植物(黑小麦、米油糠粉等植物)中生物发酵后提取SOD精酶的方法，包括以下步骤：

1)选择富含SOD酶的原料，按比例混合，并在10-40℃发酵3天；

2)加水后，使用湿法研磨或干法粉碎；

3)收集湿法研磨的浆液过滤或干法粉碎的微粒，滤液用分子筛过滤后，得到SOD粗酶液；

4)加热后放置一段时间后，再用分子筛过滤，滤液用低温喷雾冷冻干燥法处理；

5)收集干燥粉即得SOD精制酶。

优选地，本发明所述的从富SOD植物(黑小麦、米油糠粉等植物)中生物发酵后提取SOD精酶的方法中，所述步骤1)中的原料包括油松针、黑小麦麸皮、稻花香米糠、黑大蒜、沙棘、刺梨。

优选地，本发明所述的从富SOD植物(黑小麦、米油糠粉等植物)中生物发酵后提取SOD精酶的方法中，所述油松针、黑小麦麸皮、稻花香米油糠粉、黑大蒜、沙棘、刺梨的比例分别为以重量计30％、30％、30％、5％、2％、3％。

优选地，本发明所述的从富SOD植物(黑小麦、米油糠粉等植物)中生物发酵后提取SOD精酶的方法中，所述发酵的菌株为蜡质芽孢杆菌(Bacillus cereus)MEP-01(CGMCCO188-01)、短芽孢杆菌(Bacillus brevis)MEP-02(CGMCCO188-02)、坚强芽孢杆菌(Bacillus firmus)MEP-03(CGMCCO188-03)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)MEP-04(CGMCCO188-04)、球形芽孢杆菌(Bacillus sphaericus)MEP-05(CGMCCO188-05)、地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)MEP-06(CGMCCO188-06)六种芽孢杆菌(记载于专利CN 1091590A)，VIB蜡质芽孢杆菌(Bacillus cereus)(CGMCC 0137)，该菌株记载于专利CN 1035319。

所述发酵方法为使用以上7种菌株的任意一种单独发酵10-40℃发酵3天；或使用如下组合10-40℃发酵3天：

1、蜡质芽孢杆菌YIB和蜡质芽孢杆菌MEP-01的混合菌剂

2、蜡质芽孢杆菌YIB和短芽孢杆菌MEP-02的混合菌剂

3、蜡质芽孢杆菌YIB和坚强芽孢杆菌MEP-03的混合菌剂

4、蜡质芽孢杆菌YIB和枯草芽孢杆菌MEP-04的混合菌剂

5、蜡质芽孢杆菌YIB和球形芽孢杆菌MEP-05的混合菌剂

6、蜡质芽孢杆菌YIB和地衣芽孢杆菌MEP-06的混合菌剂

7、蜡质芽孢杆菌MEP-01和短芽孢杆菌MEP-02的混合菌剂

8、坚强芽孢杆菌MEP-03和枯草芽孢杆菌MEP-04的混合菌剂

生产上述混合菌剂按下列含菌比将两种菌种配成混合菌液：其配比(菌株数)分别为：

蜡质芽孢杆菌YIB与蜡质芽孢杆菌MEP-01为1∶0.5-2

蜡质芽孢杆菌YIB与短芽孢杆菌MEP-02为1∶0.5-1.5

蜡质芽孢杆菌YIB与坚强芽孢杆菌MEP-03为1∶0.5-1.5

蜡质芽孢杆菌YIB与枯草芽孢杆菌MEP-04为1∶0.5-2

蜡质芽孢杆菌YIB与球形芽孢杆菌MEP-05为1∶0.5-2

蜡质芽孢杆菌YIB与地衣芽孢杆菌MEP-06为1∶0.5-1.5