[发明专利]一种从甜菊糖苷精制母液中提取高纯度瑞鲍迪苷D的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种瑞鲍迪苷D的提取方法，具体涉及一种从甜菊糖苷精制母液中提取高纯度瑞鲍迪苷D的方法。

背景技术

甜菊糖苷中的主要糖苷有甜菊苷（ST）和瑞鲍迪苷A（RA），其他已知糖苷包括瑞鲍迪苷B（RB）、瑞鲍迪苷C（RC）、瑞鲍迪苷D（RD）、瑞鲍迪苷F（RF）、杜克苷A、甜茶苷和甜菊双糖苷。

近年来研究发现，甜菊糖苷中口感最好的成分不是甜度最高的RA，而是RD，RD的甜度大约是蔗糖的150倍，口感好，无苦涩味，但是，RD在甜叶菊中的含量很低，仅1%左右，因此，想要高回收率的提取高纯度的RD较为困难。

CN102060892A公开了一种甜菊糖甙RD的提纯方法，是将母液糖料液流过大孔吸附树脂，再用乙醇洗脱，分段收集洗脱液，浓缩，干燥，精制，得到RD。但是，由于大孔树脂的吸附选择性差，通过分段洗脱，通过确定临界点的方法收集RD的可操作性较低，RD难以富集，因此，RD的收率不高。

CN102406113A公开了一种RA和RD复配甜菊糖的制备方法，是以甜叶菊为原料，通过水提取，大孔树脂吸附，洗脱，脱色，结晶，重结晶等步骤，得到RA和RD的混合产品。但是，该方法无法获得高含量的RD。

CN103709215A公开了一种从甜菊糖结晶母液糖中提取莱鲍迪甙D的方法，是将甜菊糖母液糖用水和甲醇保温，搅拌，反复结晶，得到RD产品。但是，该方法因结晶次数过多，收率较低，且RD的纯度仅50%左右。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是，克服现有技术存在的上述缺陷，提供一种所得产品纯度、收率高，产品附加值高，绿色环保，成本低，适用于工业化生产的从甜菊糖苷精制母液中提取高纯度瑞鲍迪苷D的方法。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案如下：一种从甜菊糖苷精制母液中提取高纯度瑞鲍迪苷D的方法，包括以下步骤：

（1）结晶除杂：将甜菊糖苷精制母液加入醇溶液中，加热溶解，冷却析晶，过滤，得滤液；

（2）反相硅胶拌样：将步骤（1）所得滤液减压浓缩至无醇，在浓缩液中加入反相硅胶，混合均匀，干燥至恒重，得拌样硅胶；

（3）装柱：在空层析柱中，先装入反相硅胶，再在反相硅胶上装入步骤（2）所得拌样硅胶；

（4）洗脱：用洗脱剂对步骤（3）装柱后的层析柱进行洗脱，收集目标洗脱流出液，浓缩，干燥，得瑞鲍迪苷D粗品；

（5）精制：将步骤（4）所得瑞鲍迪苷D粗品用有机溶剂或水加热溶解，冷却，析晶，过滤，干燥，得瑞鲍迪苷D精品。

优选地，步骤（1）中，所述甜菊糖苷精制母液中瑞鲍迪苷D的质量含量为5～30%（更优选6～10%）。本发明所述甜菊糖苷精制母液来源于以甜叶菊提取物为原料，用有机溶剂结晶制备高纯瑞鲍迪苷A（RA）、甜菊苷（ST）时所产生的母液。

优选地，步骤（1）中，所述醇溶液的用量为甜菊糖苷精制母液质量的4～20倍（更优选5～10倍）。

优选地，步骤（1）中，所述醇溶液中的醇为甲醇、乙醇、异丙醇或正丁醇等中的一种或几种，醇溶液的体积浓度为50～99%。

优选地，步骤（1）中，所述加热溶解的温度为40～60℃。

优选地，步骤（1）中，所述冷却析晶的温度为10～25℃，时间为12～24h。

步骤（1）中，析晶过滤后的滤渣中含有高含量的RA和ST，可用现有技术对这两种原料进行提取。

优选地，步骤（2）中，所述减压浓缩的温度为60～90℃，真空度为-0.06～-0.09MPa。

优选地，步骤（2）中，所述干燥的温度为60～90℃。

优选地，步骤（2）中，所述反相硅胶的用量为浓缩液质量的1～2倍。拌样的目的是使物料能和反相硅胶充分吸附；若反相硅胶的用量过少，则物料无法完全吸附；若反相硅胶的用量过多，则易造成浪费并增加洗脱的难度。

优选地，步骤（2）中，所述反相硅胶的类型为C4、C8或C18等中的一种或几种。

优选地，步骤（3）中，所述反相硅胶的用量为拌样硅胶质量的1～20倍（更优选5～15倍）。先加入反相硅胶的目的是，提供一个缓冲区域，使洗脱过程中各种成分在反相硅胶中保留不同的时间。若反相硅胶的用量过少，则各种成分保留的相对时间太接近，无法达到分离的目的；若反相硅胶的用量过多，则易造成浪费并增加洗脱剂的用量。

优选地，步骤（3）中，所述层析柱的高径比为5～20:1。若高径比过小，则分离的效果差；若高径比过大，将增加洗脱剂的用量和洗脱的时间。