[发明专利]一种血必净注射液中五类化合物的检测方法

说明书

本发明提供一种血必净注射液中五类化合物的检测方法，包括以下步骤：1）制备待测液；2）配制标准溶液；3）采用超高效液相‑质谱联用分析系统同时测定第一类化合物、第二类化合物、除腺嘌呤和腺苷外的第五类化合物中任意一种或多种成分的含量；4）采用超高效液相‑高分辨质谱联用分析系统同时测定第三类化合物中任意一种或多种成分的含量；5）采用超高效液相‑质谱联用分析系统同时测定第四类化合物、第五类化合物中腺嘌呤和腺苷成分中任意一种或多种成分的含量。本发明提供一种血必净注射液中五类化合物的检测方法，可高通量、准确、全面检测血必净注射液中化学成分，对于提高制剂加工生产中的质控水平、临床研究合理选药均具有积极意义。

技术领域

本发明属于药物成分的分析技术领域，涉及一种血必净注射液中五类化合物的检测方法，具体涉及一种血必净注射液中红花黄酮类化合物、赤芍单萜糖苷类化合物、丹参儿茶酚类化合物、川芎和当归苯酞类化合物以及其它化合物共47个化合物的检测方法。

背景技术

脓毒症是由感染引起的宿主失调性反应导致的致命性器官功能障碍(SOFA评分≥2)的危重疾病。然而，目前脓毒症的治疗药物仍然非常有限，新药研发成功率低。血必净注射液是由天津红日药业股份有限公司研制生产的抗脓毒症中成药，2004年获中国FDA批准上市。该中药制剂由红花、赤芍、丹参、川芎和当归五味中药所组复方，经提取制备而成，具有活血化瘀、疏通经络、溃散毒邪的功效。作为脓毒症常规治疗中的加载药物，血必净注射液在临床上被大量使用，与抗生素(抗感染)等化药形成药效互补，是中国抗脓毒症用药特色之一。

信息学研究结果提示有四类来自血必净注射液组成中药的成分可能具有与血必净注射液抗脓毒症疗效相关的药效活性，包括：第一类成分是红花黄酮类成分(具有抗炎、抗氧化、抗凝血和保护神经细胞等药效活性)；第二类成分是赤芍单萜糖苷类成分(具有抗炎、抗氧化、抗凝血和保护神经细胞等药效活性)；第三类成分是丹参儿茶酚类成分(具有抗炎、抗氧化、保护内皮细胞和心肌细胞等药效活性)；第四类成分是川芎和当归苯酞类成分(具有抗炎、抗氧化、扩张血管、保护神经细胞等药效活性)。除此以外的血必净注射液中其它化学成分划归为第五类成分，这些成分也可能与血必净注射液的疗效相关。血必净注射液产品的质量均一性对血必净注射液临床用药的有效性和安全性进行系统再评价至关重要，而目前血必净注射液的厂方质控标准的化合物仅为芍药苷(1.0–1.7mg/mL)和羟基红花黄色素A(0.2–0.5mg/mL)(见Cheng C,Lin J-Z,Li L,Yang J-L,Jia W-W,Huang Y-H,Du F-F,Wang F-Q,Li M-J,Li Y-F,Xu F,Zhang N-T,Olaleye E.Olajide,Sun Y,Li J,Sun C-H,Zhang G-P,and Li C(2016)Pharmacokinetics and disposition of monoterpeneglycosides derived from Paeonia lactiflora roots(Chishao)after intravenousdosing of antiseptic XueBiJing injection in human subjects and rats.ActaPharmacol Sin 37:530–544.)，这两个成分仅来自于赤芍和红花，因此对于血必净注射液的质量均一性的评价是远远不够的。

目前，现有文献报道对血必净注射液中的某些成分建立了检测方法，但这些方法存在以下不足：(1)血必净注射液中一些含量相对较高、可能具有与血必净注射液疗效相关的化合物并未列入一同检测目标对象，例如：芍药内酯苷、阿魏酸等；(2)基于本研究团队前期的人体药代动力学研究结果，血必净注射液中某些化学成分在制剂中含量不高，但在人体内暴露水平(体内药物浓度)相对较高，例如：洋川芎内酯G虽然在注射液中含量不及洋川芎内酯I，但是洋川芎内酯G是静注给药血必净注射液后人体内暴露最显著的川芎当归苯酞类成分，因此这个化合物对血必净注射液临床有效性和临床用药的安全性评估也是不容忽视的。可见，有必要建立能够全面分析血必净注射液中各类化学成分含量的分析方法，对于提高制剂加工生产中的质控水平、临床合理用药均具有积极意义。

发明内容