[发明专利]牛病毒性腹泻、牛传染性鼻气管炎、牛副流感三联灭活疫苗及其制备方法

说明书

本发明涉及一种预防牛病毒性腹泻、牛传染性鼻气管炎、牛副流感的三联灭活疫苗及其制备方法。本发明所述疫苗其有效成分包括牛病毒性腹泻病毒、牛传染性鼻气管炎病毒与牛副流感3型病毒的灭活抗原,该三联灭活疫苗是利用细胞转瓶、全悬浮及微载体培养的传代细胞系进行病毒增殖，并对制苗工艺等进行了优化。疫苗安全和效力检验结果显示：使用本发明的三联灭活疫苗免疫牛后没有任何局部和全身不良反应，所有的牛都产生了免疫保护，说明本发明的疫苗安全可靠，可达到“一针三防”的目的，降低经济损失。

技术领域

本发明涉及一种牛病毒性腹泻、牛传染性鼻气管炎、牛副流感三联灭活疫苗及其制备方法，属于兽用生物制品领域。

背景技术

牛病毒性腹泻(Bovine viral diarrhea,BVD)是由属于黄病毒科、瘟病毒属的牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus，BVDV)引起的一种病毒性传染病，主要侵害牛、羊、鹿、耗牛、猪等动物，各年龄牛均易感。临床主要表现为腹泻，急、慢性黏膜病，持续性感染与免疫耐受，免疫抑制，怀孕母畜流产或产生畸形胎儿等。1946年Olafson等在美国首次发现该病，以发热、腹泻和咳嗽为特征，称为牛病毒性腹泻。Ramsey和Chiverst于1953年首先发现了黏膜病(Mucosal disease，MD)，1971年美国兽医协会将其统一命名为牛病毒性腹泻/黏膜病(BVD/MD)。该病在世界范围内广泛分布，是造成全球养牛业经济损失的主要病原。上世纪80年代初，李佑民等首次在流产胎儿的脾脏中分离并鉴定出BVDV，证明该病在我国的存在。血清学调查表明，BVD在我国呈上升趋势。

牛传染性鼻气管炎(Infectious Bovine Rhinotracheitis,IBR)是由属于疱疹病毒科、水痘病毒属的牛传染性鼻气管炎病毒(Infectious Bovine RhinotracheitisVirus,IBRV)引起的一种急性、热性、接触性传染病，又称为“坏死性鼻炎”或“红鼻病”。IBRV即牛I型疱疹病毒(BoHV-1)，能够在牛体内侵害多种系统的组织和器官，临床症状表现为高热，病牛体温可达40℃以上、食欲降低、呼吸困难、流鼻液、上呼吸道及气管黏膜发炎，病毒还可侵害生殖道。病毒感染能够诱发产奶量下降和流产，并导致肉用牛和康复牛的生长缓慢，给养牛业造成极大的损失。该病最早于上世纪50年代在美国的科罗拉多州被发现，Madin在1956年首次从病牛体内分离得到IBRV。1980年，周泰冲等首次在我国从新西兰引进的奶牛中分离鉴定了IBRV，之后广东、广西、河北、河南、内蒙古、新疆、山东、青海、黑龙江等全国各地的黑白花、本地黄牛、牦牛和水牛均有IBR感染的报道。血清学调查显示，IBR在我国牛群中广泛流行，且呈明显上升趋势。

牛副流感(Bovine parainfluenza，BP)是由属于副黏病毒科、呼吸道病毒属的牛副流感3型病毒(Bovine parainfluenza virus type 3，BPIV3)引起的一种急性呼吸道疾病，其引起的病症为牛副流行性感冒，又称“运输热”，是一种急性接触性传染病，BPIV3对牛的致病力不强，但在继发细菌、支原体及外界诱因的联合作用下，则可产生严重呼吸道症状，甚至可引起病牛的死亡。BP与BVD、IBR一起构成了牛呼吸道综合征(Bovinerespiratory disease complex,BRDC)的主要病原。目前，BRDC是引起世界范围内的饲养牛发病和死亡的主要原因，严重危害养牛业的健康发展。BP在世界上许多国家流行，我国于2008年在黑龙江首次分离到BPIV3，研究表明，BPIV3在我国抗体阳性率高。

发明内容

本发明的目在于采用一种牛肾细胞(MDBK)繁殖牛病毒性腹泻病毒、牛传染性鼻气管炎病毒、牛副流感3型病毒，进而将此三种病毒作为抗原制备成预防BVD、IBR和BP的三联灭活疫苗。

本发明的技术方案

1.一种牛病毒性腹泻、牛传染性鼻气管炎、牛副流感三联灭活疫苗，其特征在于该灭活疫苗含有牛病毒性腹泻病毒、牛传染性鼻气管炎病毒及牛副流感3型病毒的灭活抗原。