[发明专利]一种高产饲用复合酶的米曲霉菌株及其应用

说明书

本发明公开了一种高产饲用复合酶米曲霉菌株及其应用，属于生物发酵技术领域。发酵所用菌株具体为米曲霉DJ36，保藏于中国普通微生物保藏中心，保藏号为CGMCC NO.13575；多肽饲料制备过程结合液态发酵和酶解技术，具体包括：制备米曲霉菌的单孢子菌悬液，液体菌种制备，用三角瓶或发酵罐液态发酵，发酵液酶解杂蛋白，干燥、粉碎、包装等步骤。本发明通过米曲霉发酵和发酵后期酶解共同作用，高效生成功能性的小分子多肽，综合了微生物发酵和酶解技术的优点，大大减少了酶制剂的使用，降低了多肽的生产成本，加快了多肽的产业化进程；且制得的饲料添加剂具有较高的营养价值和抗病性能，具有广阔的应用前景。

技术领域

本发明涉及生物发酵技术领域，具体的涉及一种高产饲用复合酶米曲霉菌株及其应用。

背景技术

豆粕、棉籽粕、谷朊粉、羽毛粉等农副产品中粗蛋白含量高，价格低廉，但蛋白分子量较大，不易被消化利用，氨基酸组成不平衡，有效利用率较低，其饲料添加量与利用率较低。同时，还存在多种抗营养因子，如胰蛋白酶抑制因子、脲酶等，研究发现，这些抗营养因子影响了畜禽对营养成分的消化、吸收，影响动物的健康及生产性能。而农副产品发酵过程中可产生蛋白酶、非淀粉多糖酶等多种酶活，可消除抗营养因子，把大分子量的饼粕蛋白质分解为多肽、寡肽，甚至小肽，从而增加水溶性，利于动物消化吸收。

米曲霉(Aspergillus oryzae)是一种好气性真菌，易于培养，又不产生黄曲霉素，是一类有较高利用价值的霉菌。米曲霉是美国食品与药品管理局FDA认可的使用安全的菌种之一，其在在食品业、农业、畜牧业、生物技术等方面都得到了广泛的应用。米曲霉是一类产复合酶的菌株，除产蛋白酶外，还可产淀木聚糖酶、纤维素酶、植酸酶等。在蛋白酶的作用下，将不易消化的大分子蛋白质降解为蛋白胨、多肽及各种氨基酸，而且可以使辅料中粗蛋白、粗纤维、植酸等难吸收的物质降解，提高营养价值、保健功效和消化率。

目前，多肽的生产方法有酶解法和微生物发酵法。酶解法生产多肽较为简单，易于操作，且生产效率较高，但所用酶制剂较多且昂贵，生产成本很高；微生物发酵法主要是利用微生物对蛋白物料进行发酵处理，既可以将有毒的成分经微生物代谢去除，又可以通过微生物发酵将植物细胞壁彻底破坏，使得营养物质更易释放，有利于动物更快更好的吸收，而且发酵对饲料的营养成分破坏很小，不会造成营养价值降低，且成本较低、并可大量操作。但是，生产多肽需先利用微生物发酵产生蛋白酶，再用蛋白酶将难以被动物消化吸收的大分子蛋白部分降解，产生多种小分子活性多肽，其步骤较为复杂，生产效率偏低。

发明内容

1.要解决的技术问题

本发明要解决的技术问题在于提供一种高产饲用复合酶的米曲霉菌株及利用其以液态发酵和酶解复合技术制备富多肽饲料添加剂的方法，其以富蛋白农副产物为材料，以米曲霉为菌种进行发酵，高效生成后续酶解所需的蛋白酶、菊粉酶等多种酶制剂，用产生的液态混合酶制剂制备富多肽饲料添加剂。该发明充分利用了微生物发酵和酶解技术的优点，大大减少了酶制剂的分离纯化的生产成本，发酵结束后直接用发酵液处理富蛋白农副产物用，降低了多肽的生产成本，加快了多肽的产业化进程；且制得的饲料添加剂具有较高的营养价值和抗病性能，具有广阔的应用前景。

2.技术方案

本发明的目的是提供一种用于发酵产酶用于制备多肽饲料的米曲霉菌株及利用该菌株发酵制得的酶来酶解蛋白制备富多肽饲料添加剂的方法。

由背景技术中可知，要制备多肽饲料，蛋白酶必不可少。另外，菊粉作为一种纯天然的功能性配料，已被世界20多个国家批准为营养增补剂，广泛运用于乳制品、饮料、低脂低热量食品、烘培食品、保健食品。利用菊粉酶分解菊粉生产的低聚果糖低聚果糖是一种良好的双歧因子和水溶性膳食纤维，有防治便秘、抑制肠内腐败物质形成、提高机体免疫力、改善脂质代谢、降低胆固醇等作用。故而，本发明所要提供的米曲霉菌株要求能高产蛋白酶和菊粉酶。

本发明采取如下技术方案：