[发明专利]一种翻译后修饰蛋白质组学的检测和定量方法

权利要求书

1.一种翻译后修饰蛋白质组学的检测和定量方法，其特征在于，

对待检蛋白样品及内标物进行等重串联质量标签标记，对标记后的混合物进行串联质谱分析；

其中，所述内标物为富含待检测翻译后修饰的肽段混合物；

所述待检蛋白样品经过一次等重串联质量标签标记后得到；

所述内标物依次经过修饰标记和等重串联质量标签标记后得到。

2.根据权利要求1所述翻译后修饰蛋白质组学的检测和定量方法，其特征在于，所述待检测翻译后修饰类型包括：酰化、烷基化、磷酸化、泛素化、糖基化、硫酸化、硒化、巯基亚硝基化、腺苷酰化、羟基化和碘化。

3.根据权利要求1所述翻译后修饰蛋白质组学的检测和定量方法，其特征在于，所述等重串联质量标签包括：串联质量标签、同位素标记相对和绝对定量、氘同位素氨基反应标签、加州理工等重标记、可裂解等重亲和标签、N,N-二甲基化亮氨酸定量标签、等重肽末端标记法、等重末端标记定量方法标签、体内终端氨基酸代谢标记。

4.根据权利要求1所述翻译后修饰蛋白质组学的检测和定量方法，其特征在于，所述肽段混合物为初始蛋白经修饰标记并酶解后的肽段混合物，和/或，为初始蛋白酶解后经修饰标记的肽段混合物，和/或，为人工合成含待检测翻译后修饰的肽段混合物，和/或，为利用抗体或其它富集试剂对肽段库进行翻译后修饰富集后的肽段混合物。

5.根据权利要求4所述翻译后修饰蛋白质组学的检测和定量方法，其特征在于，所述修饰标记为利用修饰标记试剂对所述初始蛋白或所述初始蛋白酶解后的肽段进行化学修饰。

6.根据权利要求5所述翻译后修饰蛋白质组学的检测和定量方法，其特征在于，所述修饰标记试剂包括：酰化试剂、烷基化试剂、磷酸化试剂、糖基化试剂、泛素化试剂、硫酸化试剂、硒化试剂、腺苷酰化试剂、巯基亚硝基化、羟基化试剂和碘化试剂。

7.根据权利要求4所述翻译后修饰蛋白质组学的检测和定量方法，其特征在于，所述初始蛋白来自待检蛋白样品中的一组，和/或，待检蛋白样品各组的混合物，和/或，重组蛋白混合物。

8.根据权利要求4所述翻译后修饰蛋白质组学的检测和定量方法，其特征在于，所述初始蛋白为待检蛋白样品中各组蛋白经降维处理后的混合物。

9.根据权利要求8所述翻译后修饰蛋白质组学的检测和定量方法，其特征在于，所述降维处理所用的技术手段包括利用HPLC、阴/阳离子交换柱或C18柱进行降维。

10.根据权利要求5所述翻译后修饰蛋白质组学的检测和定量方法，其特征在于，所述初始蛋白酶解后的肽段在进行化学修饰之前经过降维处理。

11.根据权利要求10所述翻译后修饰蛋白质组学的检测和定量方法，其特征在于，所述降维处理所用的技术手段包括利用HPLC、阴/阳离子交换柱或C18柱进行降维。

12.根据权利要求6所述翻译后修饰蛋白质组学的检测和定量方法，其特征在于，所述酰化试剂包括：脂肪酸和/或芳香酸的衍生物；所述衍生物包括：活化酯、酰卤化合物、分子间缩合的酸酐、分子内缩合的酸酐、酰化辅酶A，以及能够与特定氨基酸的伯氨基、仲氨基和羟基反应的高能化合物中的一种或多种。

13.根据权利要求12所述翻译后修饰蛋白质组学的检测和定量方法，其特征在于，所述酰化试剂标记的特定氨基酸种类包括：赖氨酸、组氨酸、苏氨酸、丝氨酸、酪氨酸、精氨酸、色氨酸、5-羟赖氨酸以及蛋白末端氨基酸。