[发明专利]一种提高蛋白浓度测定准确性的快速测定试剂及其测定方法

权利要求书

1.一种提高蛋白浓度测定准确性的快速测定试剂，其特征在于：包括

沉淀试剂，所述沉淀试剂能够将蛋白样品溶液中的蛋白沉淀出来，且蛋白没有损失，并可进一步去除位于上清中的化学试剂；所述沉淀试剂按质量组分计，包括以下组分：

三氯乙酸20-30份

氯化钠25-35份

脱氧胆酸钠0.01-0.05份

水100-150份；

碱性铜试剂，所述碱性铜试剂溶解沉淀的蛋白并与蛋白的肽键结合；所述碱性铜试剂按质量组分计，包括以下组分：

五水硫酸铜0.05-0.1份

酒石酸钠钾0.1-0.5份

氢氧化钠2-10份

水200-300份；

生色试剂，未与蛋白结合的碱性铜试剂被还原后与所述生色试剂反应，产生特定范围吸收波长，最佳吸收波长的吸收值与蛋白样品溶液中的蛋白量成线性关系；：所述生色试剂按质量组分计，包括以下组分：

2，9-二甲基-1，10-菲啰啉盐酸盐0.1-0.8份

还原型谷胱甘肽3-10份

柠檬酸钠50-90份

水200-400份；

所述的提高蛋白浓度测定准确性的快速测定试剂的测试方法，将蛋白样品溶液经过沉淀试剂沉淀，碱性铜试剂溶解蛋白沉淀并与被沉淀的蛋白相结合，未与蛋白质结合的碱性铜试剂被还原并与生色试剂反应，产生特定范围的吸收波长，蛋白量与最佳吸收波长吸收值成线性关系；

具体包括以下步骤：

（1）将梯度稀释的蛋白标准样品和待测定的未知浓度蛋白样品用沉淀试剂混合；

（2）离心沉淀蛋白，去除上清，吸干残留液体，以去除位于上清中的化学试剂；

（3）碱性铜试剂溶解蛋白沉淀，并与蛋白的肽键相结合；

（4）未与蛋白结合的铜试剂在碱性条件被还原后与生色试剂下发生反应，并产生特定颜色的吸收波长；

（5）制作标准曲线，蛋白质量与最佳吸收波长吸收值成反比，根据标准曲线，确定待测蛋白样品的蛋白浓度。

2.根据权利要求1所述的提高蛋白浓度测定准确性的快速测定试剂，其特征在于：所述碱性铜试剂按质量组分计，包括以下组分：

五水硫酸铜0.0625份

酒石酸钠钾0.255份

氢氧化钠6份

水250份。

3.根据权利要求1所述的提高蛋白浓度测定准确性的快速测定试剂，其特征在于：所述生色试剂按质量组分计，包括以下组分：

2，9-二甲基-1，10-菲啰啉盐酸盐0.285份

还原型谷胱甘肽7份

柠檬酸钠75份

水250份。

4.根据权利要求1所述的提高蛋白浓度测定准确性的快速测定试剂，其特征在于：所述蛋白标准样品包括牛血清白蛋白。