[发明专利]一种从银杏叶中同时提取银杏叶多糖和银杏叶黄酮的方法

说明书

本发明公开了一种从银杏叶中同时提取银杏叶多糖和银杏叶黄酮的方法，包括以下步骤：（1）发酵：将乳酸菌与新鲜银杏叶混匀，密封条件下发酵20天以上；提取前加入活性干酵母；（2）水提，得提取液和银杏叶渣；（3）提取得银杏叶多糖；（4）提取银杏叶黄酮粗提取物；（5）银杏叶黄酮粗提取物，陶瓷膜过滤，通过大孔吸附树脂lx‑5，洗脱，洗脱液直接通过大孔树脂lxd‑200或D301，收集流出液，浓缩，喷雾干燥，得银杏叶黄酮。本发明的方法，通过对新鲜的银杏叶进行乳酸菌发酵保藏，利于活性成分的浸出，节约能源，降低生产成本。本发明的方法，银杏叶多糖和银杏叶黄酮的收率和提取率都得到了明显提高，更利于产业化应用。

技术领域

本发明涉及一种从银杏叶中同时提取银杏叶多糖和银杏叶黄酮的方法，属于天然产物提取与分离技术领域。

背景技术

银杏被称为“活化石”植物，是我国特有的珍贵树种，随着银杏叶中有效成分的药用、保健等综合价值的挖掘和开发，对银杏叶的系统研究在世界范围内掀起了高潮。银杏叶中蛋白质含量10.9％～15.5％，总糖含量7.3％～8.7％，还原糖含量4.0％～5.6％，黄酮含量0.4％～1.2％。已开发的银杏叶提取物主要是银杏叶总黄酮醇苷(含萜类内酯)提取物(简称：银杏叶黄酮)和银杏叶多糖。银杏叶黄酮和萜内酯具有清除自由基和扩张血管、拮抗血小板因子的作用；银杏叶多糖具有降低血糖、延缓衰老、提高免疫力的作用；银杏酸具有抗肿瘤、抗微生物的作用，但又有较强的胚胎毒性和细胞毒性。目前，已经有很多含银杏叶黄酮的保健食品和药品上市。关于银杏叶提取物方面的研究国内外文献报道较多，提取技术、功能应用、检测方法等等，也有相关一次性提取银杏叶多种提取物的专利报道。

中国专利申请CN 103130816A(申请号201210406959.6)公开了一种从银杏叶中制备多种活性物质的方法，包括原料前处理步骤、提取步骤、多糖沉淀步骤、大孔树脂分离步骤、硅胶干柱分离步骤、反相层析精制步骤和结晶步骤等，可同时得到银杏多糖、银杏提取物、银杏总黄酮、银杏总内酯、银杏内酯A、B、C单体等多种活性物质。所用原料是银杏叶干粉，加入纤维素酶及果胶酶破壁后，烘干，再采用乙醇溶液进行提取，提取液浓缩与金银花干粉混合絮凝得到多糖，絮凝后的上清液再经过大孔树脂分离、硅胶干柱、反相层析等步骤，得到银杏黄酮提取物、银杏内酯提取物等。该专利申请中多糖絮凝步骤额外添加了金银花干粉，银杏多糖测定结果中会含有金银花的相应成分。

中国专利CN 102603482A(申请号201210038103.8)公开了一种银杏叶多组分的分离技术，以银杏叶为原料，采用超声提取和超临界CO₂萃取——精馏相结合的技术实现有效多组分的分离。首先用不同浓度乙醇两次超声提取银杏叶，过滤得到的滤液和滤渣分别经以下工艺进行：1)将滤渣采用超临界CO₂萃取分离得聚戊烯醇类化合物；萃余物采用“水提醇沉”法分离得到银杏多糖；2)将滤液超滤、浓缩后采用超临界CO₂萃取，在适当的温度和压力下先分离得银杏酚酸类；改变萃取条件，启用精馏柱，采用轴向变温分四段加热，继续萃取分离出银杏萜类内酯和黄酮类化合物。该专利是以银杏叶为原料，先采用乙醇溶液萃取，萃取液用于分离银杏黄酮和萜类内酯，萃取渣用于制备银杏多糖。但超临界CO₂萃取产量低，产品纯度不高，且能耗和投资相对比较大，不利于大规模生产。

中国专利申请CN 105477026A(申请号201610073800.5)公开了一种从银杏外种皮中联合提取银杏酸、黄酮和萜内酯以及多糖的工艺，干燥的银杏外种皮经多次萃取后得到银杏酸粗提物和一次残渣，银杏酸粗提物进一步提纯后得到纯度大于97wt％的银杏酸；一次残渣经多次浸提后得到黄酮和萜内酯粗提物和二次残渣，黄酮和萜内酯粗提物进一步纯化后得到黄酮≥24wt％、萜内酯≥6wt％提取物；二次残渣经多次水提后得到多糖粗提物和无毒残渣，多糖粗提物进一步纯化后得到纯度大于98wt％银杏多糖。该专利中原料是银杏的外种皮，提取工艺是先分离得到银杏酸，再制备银杏黄酮，最后分离银杏多糖。