[发明专利]一种呼吸道病毒快速检测试剂盒及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及医学诊断领域，具体涉及一种多用途的呼吸道病毒快速检测试剂盒及其制备方法。

发明背景

目前已证明，95％的急性上呼吸道疾病和大部分的下呼吸道疾病是由细菌外的病原引起，其中以呼吸道病毒最常见，包括呼吸道合胞病毒(RSV)A型、B型、腺病毒(ADV)、流感病毒A(FluA)、流感病毒B(FluB)、副流感病毒1(PIV1)、副流感病毒2(PIV2)、副流感病毒3(PIV3)、柯萨奇B组病毒等。其中，多种病毒具有感染力强、传播快、潜伏期短、发病急等特点，并且近来新的致病性病毒还在不断地被发现，如人类偏肺病毒、SARS病毒、高致病性禽流感病毒以及如今风靡全球的H1N1甲型流感病毒等，给临床疾病诊断和治疗造成极大的困难。

呼吸道感染是世界范围内低龄儿童(<5岁)死亡的首位原因，每年可造成约5百万儿童死亡。儿童上呼吸道感染的患病次数平均为3-8次/年，下呼吸道感染率比URTI低，在1岁儿童中感染的比例约1～3％，学龄儿童至5％～10％。呼吸道病毒习惯上是指侵害呼吸道的病毒，至少涉及到8个科，200多种型别的病毒。临床常见的可导致呼吸道感染的病毒有腺病毒(AdV)、甲型/乙型流感病毒(FluA和FluB)和呼吸道合胞病毒(RSV)等。

腺病毒(AdV)是一种没有包膜的直径为70～90nm的颗粒，线状双链DNA病毒。分为两个属，6个亚群(A-F)，包括51个血清型。腺病毒可通过人、水、媒介物和器械传播,室温条件下,腺病毒在污物中存在周期可延长至3周。腺病毒在儿童和军营人员中更易发生感染和大规模流行,大多数婴幼儿在出生后的5年内至少感染过1种腺病毒株。该病毒可导致肺炎、发热上呼吸道疾病、结膜炎、膀胱炎、肠胃炎等，根据感染者的免疫和心肺功能的不同可导致严重的呼吸窘迫甚至死亡。ADV感染全年散发，冬春季相对较多，阳性检出率最高可达15％。可从呼吸道分泌物标本、眼拭、咽拭或粪便中分离到病毒，也可采用IFT、RIA或ELISA等方法测定病毒抗原作出快速诊断，在病毒分离阳性的病人中阳性率为60％～65％，在感染后7天可出现中和抗体、血凝抑制抗体和补体结合抗体。用血清学方法测定抗体可明确诊断。

甲型流感病毒和乙型流感病毒(FluA和FluB)主要包括内部的核心和外部的病毒囊膜，核心是由核蛋白卷曲包绕螺旋形RNA组成，核蛋白的抗原稳定，很少发生变异，具有型特异性。根据核蛋白抗原性的不同，将流感病毒分甲(A)、乙(B)、丙(C)三型，三型病毒具有相似的生化和生物学特征。猪和禽类可携带甲型流感，乙、丙型流感仅在人之间转播。甲型和乙型流感的临床症状相似，但是甲型流感病毒导致的住院率四倍于乙型流感病毒。乙型流感通常有肌炎及胃肠道症状。丙型流感很少有下呼吸道症状，但偶尔会造成上呼吸道疾病。可引起急起高热、显著乏力，全身肌肉酸痛，而鼻塞、流涕和喷嚏等上呼吸卡他症状相对较轻。本病具有自限性，但在婴幼儿、老年人和存在心肺基础疾病的患者容易并发肺炎等严重并发症而导致死亡。一般出现于冬季，北半球通常在1、2月份达到高峰，南半球的流行时间较晚，热带地区可常年发病。世界性大流行常有2～3个流行波，一般流行3～4周会自然停止。世界卫生组织估计北半球每年1亿人感染流感，5000万次就诊，30万次住院，主要是高危人群和老年人，每年1万人死于流感，主要是虚弱的老年人。

呼吸道合胞病毒(RSV)是一种RNA病毒，于1950年首先从实验室患上呼吸道感染的猩猩中分离而得，是有包膜的单股RNA病毒，直径为120～200nm，属于副粘病毒科的肺病毒属，仅有1个血清型。多见于新生儿和6个月以内的婴儿，可由空气飞沫和密切接触传播，潜伏期3～7日，传染性强。应用单克隆抗体可将RSV分为A、B两个亚型,有文献报道RSV A亚型感染起病急,病情重；B亚型感染病情相对较轻。RSV是世界各地婴幼儿病毒性肺炎和毛细支气管炎的主要病原体之一，严重威胁婴幼儿健康，尤其是早产儿、先天性心脏病患儿、免疫缺陷的婴儿和儿童易发严重性RSV感染。从新生儿到成年人任何年龄组都会感染合胞病毒。婴幼儿症状较重，可有高热、鼻炎、咽炎及喉炎，以后表现为细支气管炎及肺炎。少数病儿可并发中耳炎、胸膜炎及心肌炎等。成人和年长儿童感染后，主要表现为上呼吸道感染。有研究表明RSV流行季节集中于每年的冬春季(11月至翌年3月，高峰出现在12月至翌年1月)，我国北京地、杭州、苏州及其他温带国家(如日本、美国)均一致，就诊的儿童患者阳性率可达42.50％。