[发明专利]用于高产细菌素的植物乳杆菌SWUN5815及其应用

权利要求书

1.一种用于高产细菌素的植物乳杆菌SWUN5815，其特征在于，该菌株已于2016年08月02日保藏于保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏号为CCTCC NO:M2016419。

2.根据权利要求1所述的用于高产细菌素的植物乳杆SWUN5815，其特征在于，所述植物乳杆菌的形态学特征具体为：

菌体特征：呈革兰氏染色阳性，细胞杆状，菌体约0.5-1.0μm宽，1.5-4μm长，成单、成对或者成链，不形成芽孢，两端圆形；

菌落特征：在MRS培养基上形成明显的菌落，直径在0.5-2.0mm之间，圆形，边缘整齐，乳白色，透明，表面湿润光滑，不产生色素。

3.根据权利要求1所述的用于高产细菌素的植物乳杆菌SWUN5815，其特征在于，所述植物乳杆菌体内耐受特征为：

植物乳杆菌的菌株耐酸性较强，在pH3.0的人工胃液下3h后存活率为92.46±4.06％；在1.0％浓度胆盐下可以缓慢生长，生长效率达到无胆盐培养的17.36±1.19％。

4.权利要求1所述的植物乳杆菌SWUN5815在制备植物乳杆菌细菌素中的应用。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，包括以下步骤：将权利要求1所述的植物乳杆菌SWUN5815接种于MRS培养基中培养，得到植物乳杆菌菌发酵液。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，制备植物乳杆菌细菌素的方法具体为：

1)把菌株SWUN5815保存液接种到5mL的MRS液体培养基中，震荡混匀，37℃恒温培养24h，以2％的接种量连续活化三代，取第三代的发酵液以4000×g离心10min，取上清，上清液经0.22μm微膜过滤，-20℃冰箱保存备用，制备得到粗植物乳杆菌MRS发酵上清液；

2)收集后指数生长期的植物乳杆菌MRS发酵上清液500mL，4℃，12000×g离心20min收集上清液，以0.22μm的滤膜过滤上清液以除去残余的细胞碎片；加入预冷的三氯乙酸/丙酮溶液至三氯乙酸的终浓度为12.5％，-20℃静置8h使蛋白充分沉淀，4℃，15000×g离心20min收集蛋白沉淀，向沉淀中加入80％的预冷丙酮反复洗涤3-5次以除去残留的三氯乙酸，室温放置4-5min使丙酮完全挥发，加入100μL超纯水溶解蛋白沉淀，制备得到纯化后的植物乳杆菌MRS发酵上清液，即为植物乳杆菌细菌素。

7.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，MRS培养基成分如下：蛋白胨10.0g、牛肉膏10.0g、酵母粉5g、葡萄糖20.0g、吐温801.1g、磷酸氢二钾2.0g、乙酸钠3.0g、柠檬酸二胺2.0g、硫酸镁0.6g、硫酸锰0.25g以及蒸馏水1000mL。