[发明专利]一种复合抑藻剂的制备方法

权利要求书

1.一种复合抑藻剂的制备方法，包括以下步骤：

a)消毒工序：将金鱼藻(Ceratophyllum demersum L_.)于室温中浸入重量浓度为3％的次氯酸钠(NaClO)溶液中，静置3-5分钟，进行消毒，再用无菌水清洗冲洗5-6次，金鱼藻与次氯酸钠溶液的重量比为1:8-12；

b)培养工序：将上述消毒好的金鱼藻放入盛有Hoagland(0.1×)培养液的1000mL锥形瓶中，再按10⁵个/mL细菌密度加入微生物菌种，用消毒牛皮纸封口，于25℃、光照强度4000lx的环境中培养0.5-1.0个月，用定性滤纸过滤，取滤液进行抑藻，金鱼藻与Hoagland(0.1×)培养液的重量体积比为1：90-120；

所述的微生物菌种通过以下方法制备：

取金鱼藻植株周围0.1m*0.1m水样，用定性滤纸过滤，以消除原生动物并去除水中杂质，取0.3ml涂于含有牛肉膏蛋白胨琼脂培养基的平板，37℃条件下培养48h，用平板划线法进行反复分离纯化，将纯化的单克隆菌种分别接入盛有500mL牛肉膏蛋白胨液体培养基或500mL PDA液体培养基的1000mL锥形瓶中，置于150r/min,30℃条件下振荡培养3d，将培养好的菌液4000r·min^-1离心15min，得到沉淀物，将沉淀物加入到BG-11培养基摇匀，驯化培养48h进行抑藻实验，抑藻时细菌在藻液中的个数为10⁵～10⁶个/mL，选取10⁵个/mL时，第4天的抑藻效率大于40％的菌种。

2.根据权利要求1所述的一种复合抑藻剂的制备方法，其特征在于：

所述的牛肉膏蛋白胨培养基：牛肉膏5.0g，蛋白胨10.0g，NaCl 5g，水定容至1000mL，pH7.2-7.4。

3.根据权利要求1所述的一种复合抑藻剂的制备方法，其特征在于：

所述的PDA培养基：新鲜去皮土豆200g，煮烂取上清，葡萄糖20g，水定容至1000mL。