[发明专利]半胱氨酸荧光分析方法

权利要求书

1.一种测定半胱氨酸的荧光分析方法，其特征是在EP管中分别加入半胱氨酸溶液、磷酸盐缓冲液、对苯二甲酸、纳米氧化铜，温浴反应后，测定荧光，反应产物最大激发波长和荧光波长分别为315 nm和421 nm，荧光强度与半胱氨酸浓度相关，以测定半胱氨酸；具体步骤为，将0.5 mL浓度为20 mmol/L的对苯二甲酸，0.5 mL半胱氨酸和50 µL浓度为560 mg/L的纳米氧化铜加入到2.95 mL浓度为200 mmol/L 的pH为7的磷酸盐缓冲液中，混合摇匀后置于65 ℃温浴，10分钟后测定其在421 nm处的荧光强度，激发波长为315 nm；所使用的纳米氧化铜由以下方法制备而得：取0.02 mol/L的醋酸铜溶液150 mL和0.5 mL冰醋酸加入到装有冷凝管的三颈瓶中，搅拌加热至沸腾；快速加入0.04 g/mL的氢氧化钠溶液10 mL，加完后继续搅拌5分钟，得到黑色氧化铜沉淀；将反应得到的黑色氧化铜沉淀离心，用无水乙醇洗涤三次，减压干燥，得到纳米氧化铜粉体。

2. 一种测定药品中半胱氨酸的荧光分析方法，其特征是取0.06 g药品加入到50 mL蒸馏水中超声溶解，用蒸馏水稀释80倍得到样品溶液；将0.5 mL样品溶液，0.5 mL浓度为20mmol/L对苯二甲酸和50 µL 浓度为560 mg/L的纳米氧化铜加入到2.95 mL 浓度为200mmol/L, pH为7.0的磷酸盐缓冲液中，混合后置于65 ℃水浴中反应10分钟；反应产物用荧光分光光度计测定421 nm处的荧光强度，激发波长为315 nm，根据半胱氨酸的标准曲线计算药品中半胱氨酸含量；所使用的纳米氧化铜由以下方法制备而得：取0.02 mol/L的醋酸铜溶液150 mL和0.5 mL冰醋酸加入到装有冷凝管的三颈瓶中，搅拌加热至沸腾；快速加入0.04 g/mL的氢氧化钠溶液10 mL，加完后继续搅拌5分钟，得到黑色氧化铜沉淀；将反应得到的黑色氧化铜沉淀离心，用无水乙醇洗涤三次，减压干燥，得到纳米氧化铜粉体。

3. 一种测定血浆中半胱氨酸的荧光分析方法，其特征是血浆经超滤得到血浆样品，将0.5 mL浓度为20 mmol/L的对苯二甲酸，0.5 mL血浆样品和50 µL浓度为560 mg/L的纳米氧化铜加入到2.95 mL浓度为200 mmol/L 的pH为7的磷酸盐缓冲液中，混合摇匀后置于65 ℃温浴，10分钟后测定其在421 nm处的荧光强度，激发波长为315 nm，根据半胱氨酸标准曲线计算血浆中半胱氨酸含量；所使用的纳米氧化铜由以下方法制备而得：取0.02 mol/L的醋酸铜溶液150 mL和0.5 mL冰醋酸加入到装有冷凝管的三颈瓶中，搅拌加热至沸腾；快速加入0.04 g/mL的氢氧化钠溶液10 mL，加完后继续搅拌5分钟，得到黑色氧化铜沉淀；将反应得到的黑色氧化铜沉淀离心，用无水乙醇洗涤三次，减压干燥，得到纳米氧化铜粉体。