[发明专利]一株甲基营养芽孢杆菌KACC13105及其应用有效
申请号: | 201710151635.5 | 申请日: | 2017-03-15 |
公开(公告)号: | CN106929445B | 公开(公告)日: | 2020-06-05 |
发明(设计)人: | 杜丰玉;牛赡光;肖琳;周远明;王学军 | 申请(专利权)人: | 青岛秾贝尔生物工程有限公司 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12P1/04;A01N63/22;A01P7/04;C12R1/07 |
代理公司: | 济南诚智商标专利事务所有限公司 37105 | 代理人: | 韩百翠 |
地址: | 266600 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 甲基 营养 芽孢 杆菌 kacc13105 及其 应用 | ||
1.甲基营养芽孢杆菌(Bacillus methylotrophicus)KACC13105,所述菌株的保藏编号为CGMCC No.13437。
2.权利要求1所述的甲基营养芽孢杆菌KACC13105在制备防治甜菜夜蛾的发酵产物中的用途。
3.权利要求1所述的甲基营养芽孢杆菌KACC13105的发酵方法,其特征是:
1)将保存的甲基营养芽孢杆菌KACC13105接种于LB固体平板表面,30℃培养2-4天,作为规模发酵培养的菌种,待用;
2)将菌种接种于无菌的、盛有LB液体培养基的锥形瓶中,30℃、120rpm摇床培养10-20天,得到发酵产物待用;所述发酵培养基为:1%胰蛋白胨,0.5%酵母提取物,1%NaCl,蒸馏水,pH调至7.0。
4.采用权利要求3所制备的发酵产物同时制备洗脱组分I和洗脱组分Ⅱ的方法,其特征是:
1)将发酵产物先采用有机溶剂提取,提取液减压蒸馏得浸膏;
2)然后浸膏进行柱层析分离;
3)以氯仿-甲醇梯度洗脱,收集氯仿-甲醇体积比10:1梯度的洗脱组分I与体积比5:1梯度的洗脱组分Ⅱ备用。
5.如权利要求4所述的方法,其特征是,所述有机溶剂为乙酸乙酯、氯仿、丙酮、甲醇、乙醇或者正丁醇中的一种或几种。
6.如权利要求4所述的方法,其特征是,所述柱层析采用硅胶柱层析、凝胶柱层析、反相柱层析或者大孔吸附树脂柱层析中的一种或几种。
7.权利要求4-6中任意一项所制备的洗脱组分I和洗脱组分Ⅱ在制备防治甜菜夜蛾的微生物杀虫剂方面的用途。
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