[发明专利]一种基于适配体的金@DTNB@银纳米三角的真菌毒素检测方法有效
申请号: | 201710119555.1 | 申请日: | 2017-03-02 |
公开(公告)号: | CN106970064B | 公开(公告)日: | 2019-08-27 |
发明(设计)人: | 陈全胜;杨明秀;李欢欢;欧阳琴;郭志明;孙浩;刘妍 | 申请(专利权)人: | 江苏大学 |
主分类号: | G01N21/65 | 分类号: | G01N21/65;B82Y30/00;B82Y40/00;B82Y5/00 |
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地址: | 212013 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 基于 适配体 修饰 dtnb 纳米 三角 真菌 毒素 检测 方法 | ||
1.一种基于适配体的金@DTNB@银纳米三角的真菌毒素检测方法,其特征在于,该方法包括如下具体步骤:
步骤1)真菌毒素适配体修饰的金@DTNB@银纳米三角的制备:采用三步金种子诱导法合成粒径均一的金纳米三角,在已合成的金纳米三角表面通过静电吸附作用修饰DTNB拉曼信号分子,进一步通过调控加入硝酸银的量来制备合适银壳层厚度的金@DTNB@银纳米三角,用三(2-氯乙基)磷酸酯活化巯基修饰的真菌毒素适配体,然后将其通过Au-S键连接到金@DTNB@银纳米三角上,得到真菌毒素检测信号放大探针;
步骤2)真菌毒素适配体修饰的壳聚糖四氧化三铁磁性材料的制备:采用溶剂热法合成壳聚糖四氧化三铁磁性材料,壳聚糖含有大量的氨基,使磁性材料表面含有氨基,通过戊二醛交联法将氨基修饰的适配体连接到壳聚糖四氧化三铁磁性材料表面,得到真菌毒素检测捕获探针;
步骤3)表面增强拉曼光谱检测体系的构建:首先将100μL不同浓度的真菌毒素加入到100μL步骤1)得到的真菌毒素检测信号放大探针中,室温下孵育2h,向溶液中加入200μL步骤2)得到的真菌毒素检测捕获探针,继续孵育6h,磁分离去除上清液,沉淀重新分散到100μL,Tris-HCl缓冲溶液中,用拉曼光谱仪在780nm激光激发下采集不同浓度真菌毒素组装体系的拉曼信号,从而建立组装体系拉曼信号强度和对应真菌毒素浓度间的标准曲线。
2.根据权利要求1所述的一种基于适配体的金@DTNB@银纳米三角的真菌毒素检测方法,其特征在于,金纳米三角的制备:采用三步金种子诱导法合成粒径均一的金纳米三角,金种子溶液合成后室温下放置3h,除去过量的硼氢化钠再进行下一步的金纳米三角的生长。
3.根据权利要求1所述的一种基于适配体的金@DTNB@银纳米三角的真菌毒素检测方法,其特征在于在金种子溶液和生长溶液中快速加入碘化钠来增加金纳米三角的产率,通过在每40mL金纳米三角溶液中加入6mL,25%质量分数的DTAC来纯化金纳米三角。
4.根据权利要求1所述的一种基于适配体的金@DTNB@银纳米三角的真菌毒素检测方法,其特征在于,金@DTNB@银纳米三角的制备,将银壳层包覆在金纳米三角外,银壳层厚度为10±5nm。
5.根据权利要求1至4任一项所述的一种基于适配体的金@DTNB@银纳米三角的真菌毒素检测方法,其特征在于,表面增强拉曼光谱检测体系的构建:在100μL真菌毒素适配体修饰的壳聚糖四氧化三铁磁性材料中加入100μL不同浓度的真菌毒素,室温下孵育2h,反应结束后,加入上述合成的真菌毒素适配体链修饰的金@DTNB@银纳米三角溶液200μL,充分混合后室温下孵育6h,磁分离去除上清液,沉淀重新分散到100μL,Tris-HCl缓冲溶液中;用拉曼光谱仪在780nm激光激发下采集不同真菌毒素浓度组装体系的拉曼信号,从而建立了组装体系拉曼信号强度和对应真菌毒素浓度间的标准曲线。
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