[发明专利]刺激免疫细胞活化的多肽、融合蛋白及其制备方法

权利要求书

1.多肽，其包含选自以下的序列或由选自以下的序列组成：如SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列。

2.融合蛋白，其包含权利要求1所述的多肽以及一个或多个融合伴侣；优选地，所述融合伴侣包含选自β2-微球蛋白、Fc区或其部分、免疫球蛋白重链恒定区、蛋白标签、神经酰胺样糖脂抗原中的一个或多个；任选地，所述融合蛋白还包含连接子，优选地，所述连接子包含甘氨酸/丝氨酸间隔子。

3.如权利要求2所述的融合蛋白，其中所述融合伴侣包含β2-微球蛋白、和/或Fc区或其部分、和/或蛋白标签；

优选地，所述Fc区为IgG1Fc区，例如人IgG1Fc区，和/或所述蛋白标签为实现蛋白质生物素化的标签，例如BriA tag；

更优选地，所述β2-微球蛋白包含或由如SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列组成，和/或所述Fc区或其部分包含或由如SEQ ID NO：3所示的氨基酸序列组成，和/或所述蛋白标签包含或由如SEQ ID NO：4所示的氨基酸序列组成。

4.如权利要求2或3所述的融合蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID NO：5所示，或者为与SEQID NO：5所示的序列相差至少一个氨基酸的取代、缺失或添加且具有刺激免疫细胞活化功能的蛋白。

5.多核苷酸，其编码权利要求1所述的多肽；

优选地，所述多核苷酸包含SEQ ID NO：6所示的核苷酸序列；

更优选地，所述多核苷酸序列由SEQ ID NO：6所示的核苷酸序列组成。

6.核酸分子，编码权利要求2-4中任一项所述的融合蛋白；

优选地，所述核酸分子包含SEQ ID NO：7所示的核苷酸序列；

更优选地，所述核酸分子由SEQ ID NO：7所示的核苷酸序列组成。

7.重组载体，其包含权利要求5所述的多核苷酸或权利要求6所述的核酸分子。

8.宿主细胞，其包含权利要求1所述的多肽、权利要求2-4中任一项所述的融合蛋白、权利要求5所述的多核苷酸、权利要求6所述的核酸分子或权利要求7所述的重组载体；

优选地，所述宿主细胞为哺乳动物细胞；更优选地，所述宿主细胞为CHO细胞、293T细胞、JY细胞、BM92细胞、WIN细胞、MOC细胞、MG细胞、NSO细胞、SP2细胞、BHK细胞、COS细胞、HepG2细胞、A549细胞、HELA细胞、CVI细胞、COS细胞、R1610细胞、BALBC/3T3细胞、HAK细胞、SP2/O细胞、P3x63-Ag3.653细胞、BFA-1c1BPT细胞或RAJI细胞；

更优选地，所述宿主细胞为CHO-K1细胞。

9.权利要求2-4中任一项所述的融合蛋白的制备方法，包括：

将权利要求6所述的核酸分子转入宿主细胞中，培养所述宿主细胞；以及收获所述融合蛋白；

优选地，所述制备方法还包括纯化所述融合蛋白。

10.权利要求1所述的多肽、权利要求2-4中任一项所述的融合蛋白、权利要求5所述的多核苷酸、或权利要求6所述的核酸分子在制备用于调节个体免疫反应、或在制备用于细胞免疫疗法的药物中的用途。