[发明专利]一种利用内壳鉴定柔鱼类日龄的方法

说明书

本发明涉及水产学领域，具体是一种利用内壳鉴定柔鱼类日龄的方法，包括内壳横截面的研磨以及生长纹观测和计数的方法，主要步骤为提取、清洗、脱水、干燥、剪裁、树脂包埋、切割、固定、打磨、抛光、图片制作和生长纹计数等过程。本发明解决内壳不易研磨，研磨易脱落以及生长纹不易观察和计数的问题，提供一种能够快速准确研磨至最佳平面，保证较高的制片成功率，同时准确的判读生长纹数目的方法。

技术领域

本发明涉及水产学领域，涉及一种内壳生长纹的观测方法，具体地说，是一种利用内壳鉴定柔鱼类日龄的方法。

背景技术

柔鱼类为软体动物门、头足纲、枪型目，柔鱼科种类的总称，寿命在1岁左右，它们是重要的海洋经济种类，广泛分布于世界各大洋和南、北极等海域。日龄鉴定作为柔鱼类渔业生物学和生态学的重点内容，一直以来受到国内外学者广泛关注。耳石、角质颚等被认为是用来鉴定柔鱼类日龄的可靠材料，过去也有研究尝试利用内壳表面的生长纹来鉴定柔鱼类的日龄，但是因其早期的生长纹判读困难而无法用于日龄鉴定。

发明内容

本发明的目的在于提供一种利用内壳鉴定柔鱼类日龄的方法，主要步骤为提取、清洗、脱水、干燥、剪裁、树脂包埋、切割、固定、打磨、抛光、图片制作和生长纹计数等过程；对内壳茎部的横截面进行打磨，即由内壳的远端和近端分别向茎部中部研磨成薄片；制作好的切片用CCD拍照，以保证今后随时可以读取生长纹；生长纹由内壳背侧核心处向腹侧边缘计数。

本方法利用形态稳定、容易提取、研磨方便的内壳来鉴定柔鱼类的日龄，包括柔鱼类内壳切片的制作步骤和内壳生长纹的观察与计数步骤，通过读取内壳横截面的生长纹数目来鉴定柔鱼类的日龄，为直接鉴定柔鱼类的日龄提供了一个新方法。

为了实现上述目的，本发明的第一方面，提供一种利用内壳鉴定柔鱼类日龄的方法，包括以下步骤：

a、剪裁：取出内壳，截取内壳茎部；

b、包埋：按1:1～1:1.5的体积比将压克力粉和液体固化剂配置成的冷埋树脂溶液，倒入模具中，使溶液包裹整个茎部，并充满模具，然后放置室温避光处待其硬化；

c、切割：将包埋硬化后的树脂沿内壳的横截面切割成树脂薄片；

d、固定：将步骤c得到的树脂薄片近端朝下，固定在载玻片上；

e、打磨：将固定在载玻片上的树脂薄片远端打磨，先粗磨再细磨至中部；

f、抛光：将经打磨的内壳树脂薄片抛光研磨面，除去油质和杂质，完成所述树脂薄片一面的研磨；

g、将步骤f抛光好的树脂薄片连同载玻片放在加热台上加热直至树脂软化，取下树脂薄片，干燥后，将树脂薄片翻面，固定在载玻片上，然后由远端向中部先粗磨再细磨直至横截面的生长纹清晰可见，最后再抛光得到内壳切片；

h、生长纹观察：由内壳背侧核心处向腹侧边缘计数生长纹的数目。

优选的，步骤a中的裁剪要将内壳柄部和尾椎部剪除，只留下茎部。

优选的，步骤d中也可将内壳远端朝下粘于载玻片上，然后由内壳近端向中部打磨、抛光和实施后续步骤。

优选的，步骤a中剪裁之前对内壳进行预处理，包括如下步骤：

A、提取：用解剖刀、剪刀小心提取柔鱼内壳，防止内壳断裂、破碎；

B、清洗：用清水将内壳表面清洗干净；

C、脱水：清洗后的内壳放入无水酒精中脱水30天；

D、干燥：将经步骤C处理的内壳放入通风橱中让其自然干燥1周左右。

优选的，步骤h中的生长纹计数步骤为：