[发明专利]靶向胸苷酸合酶的RNAi分子及其应用

说明书

本申请是国际申请日为2010年03月29日、国际申请号为PCT/JP2010/055521、进入国家阶段的申请号为201080015581.6、发明名称为“靶向胸苷酸合酶的RNAi分子及其应用”的PCT申请的分案申请。

技术领域

本发明涉及靶向胸苷酸合酶的RNAi分子，包含该RNAi分子的抗肿瘤剂，包含该RNAi分子的加强5-FU抗肿瘤剂的抗肿瘤作用的试剂，和包含该RNAi分子和5-FU抗肿瘤剂（特别是包含替加氟、吉美嘧啶和氧嗪酸钾的组合药物）的药物组合物。

背景技术

5-FU抗肿瘤剂，例如5-氟尿嘧啶（下文称为“5-FU”），包含替加氟和尿嘧啶的组合药物，或包含替加氟、吉美嘧啶和氧嗪酸钾的组合药物（以1：0.4：1的摩尔比例包含替加氟、吉美嘧啶和氧嗪酸钾的组合药物，下文称为“S-1”）通常用于治疗多种类型的癌症，包括消化系统癌症和非小细胞肺癌。已知涉及DNA合成的胸苷酸合酶（下文称为“TS”）是5-FU的靶分子。因此迄今为止许多临床试验已报导了TS表达水平和对5-FU抗肿瘤剂的敏感性之间的相关性。特别地，5-FU抗肿瘤剂对展示相对低的TS表达水平的癌症患者的作用显著，尽管许多展示相对高的TS表达水平的癌症患者对5-FU抗肿瘤剂具有抗性(Patrick G. Johnston 等人, Cancer Res., 1995; 55: 1407-12; Kun-Huei Yeh 等人, Cancer, 1998; 82: 1626-31)。因此，期待开发新的加强5-FU抗肿瘤剂的抗肿瘤作用的癌症治疗技术用于展示相对高的TS表达水平和对5-FU抗肿瘤剂具有抗性的癌症患者。

也有报导TS表达可被RNA干扰（下文称为“RNAi”）的使用所抑制，RNAi已被开发为抑制给定基因的表达的工具（日本专利公开(Kokai) No. 2005-253342 A）。因此，已经尝试了通过RNAi抑制TS表达加强5-FU抗肿瘤剂的抗肿瘤作用，尽管加强抗肿瘤作用的效果还不令人满意(Kadota 等人, the 67th Annual Meeting of the Japanese Cancer Association, 2008, p. 235, P-4274)。

发明内容

本发明要达到的目的

本发明旨在提供可显著加强5-FU抗肿瘤剂的抗肿瘤作用的新RNAi分子。

达到目的的手段

在上述情况下，本发明人进行了有关可显著加强5-FU抗肿瘤剂的抗肿瘤作用的新RNAi分子的研究。结果，他们发现了可以特别显著的水平抑制TS表达的新RNAi分子。本发明人也确认了这样的RNAi分子可显著抑制TS表达和因此施加抗肿瘤作用并加强5-FU抗肿瘤剂的抗肿瘤作用（特别是包含替加氟、吉美嘧啶和氧嗪酸钾的组合药物）。这导致了本发明的实现。

具体地，本发明如下描述。

[1]能够通过RNAi作用抑制胸苷酸合酶表达的RNAi分子，其包含由与反义链杂交的由SEQ ID NO: 1, 3或5所代表的核苷酸序列组成的有义链构成的双链RNA结构域，所述反义链在严格杂交条件下与所述有义链杂交。

[2]根据[1]的RNAi分子，其包含任意以下有义链和反义链组合：

由SEQ ID NO: 1所代表的核苷酸序列组成的有义链和由SEQ ID NO: 2所代表的核苷酸序列组成的反义链；

由SEQ ID NO: 3所代表的核苷酸序列组成的有义链和由SEQ ID NO: 4所代表的核苷酸序列组成的反义链；或

由SEQ ID NO: 5所代表的核苷酸序列组成的有义链和由SEQ ID NO: 6所代表的核苷酸序列组成的反义链。

[3]根据[1]或[2]的RNAi分子，其中所述有义链通过接头区与反义链连接。

[4]根据[3]的RNAi分子，其由SEQ ID NO: 8所代表的核苷酸序列组成。

[5]包含根据[3]或[4]的RNAi分子的模板DNA并表达RNAi分子的载体。

[6]包含根据[1]至[4]中任一项的RNAi分子和/或根据[5]的载体的抗肿瘤剂。

[7]用于治疗和/或预防癌症的药物组合物，其包含与5-FU抗肿瘤剂组合的根据[1]至[4]中任一项的RNAi分子和/或根据[5]的载体。

[8]根据[7]的药物组合物，其中5-FU抗肿瘤剂是包含替加氟的组合药物。

[9]根据[8]的药物组合物，其中5-FU抗肿瘤剂是包含替加氟、吉美嘧啶和氧嗪酸钾的组合药物。