[发明专利]一种重组人颗粒细胞酶溶液及其制备方法

权利要求书

1.一种重组人颗粒细胞酶溶液，其特征在于：采用对卵子进行处理的重组人颗粒细胞酶干粉溶解于含有抗菌素和指示剂的盐溶液中配制而成。

2.根据权利要求1所述的重组人颗粒细胞酶溶液，其特征在于：所述抗菌素为庆大霉素，浓度为5-11μg/ml。

3.根据权利要求2所述的重组人颗粒细胞酶溶液，其特征在于：所述指示剂为为酚红，浓度9.0-10.0μg/ml。

4.根据权利要求1-3任意一项所述的重组人颗粒细胞酶溶液，其特征在于：所述盐溶液是以HEPES或者MOPS为缓冲剂，以钠、钾、镁、钙离子为基础，并以葡萄糖、丙酮酸钠、乳酸钠、白蛋白为能量物质的化合物溶液；其中包含：氯化钠98.11-102.00mmol/L、氯化钾4.55-4.70mmol/L、硫酸镁0.18-0.22mmol/L、氯化钙1.92-2.12mmol/L、碳酸氢钠3.90-4.10mmol/L、缓冲剂19.99-22.00mmol/L、葡萄糖2.68-2.88mmol/L、丙酮酸钠0.31-0.33mmol/L、乳酸钠21.11-21.66mmol/L、磷酸二氢钾0.36-0.39mmol/L；

所述白蛋白为重组人血清白蛋白，是采用医疗级的重组人血清白蛋白干粉溶解于在盐水溶液中制备而成，终浓度为5mg/ml。

5.如权利要求4所述重组人颗粒细胞酶溶液的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：

(1)称量好各种组分，备用；

(2)称量好的组分中，除了抗菌素、指示剂、碳酸氢钠以外的各组分溶于超纯注射级用水中，溶解过程中遵循先固体后液体的原则；所述超纯注射级用水经0.1-0.μM滤膜过滤的，内毒素＜0.5EU/ml；

(3)向步骤(2)制得的盐溶液中依次加入称量好的抗菌素、指示剂、碳酸氢钠；

(4)检测步骤(3)所得盐溶液的渗透压和pH值，并记录最终渗透压和pH值；所述渗透压保持为250-275mOsm/Kg，所述pH值保持为7.0-7.4；

(5)按照预配置的容量，将终浓度为5mg/ml的重组人血清白蛋白补充到盐溶液中；

(6)将重组人颗粒细胞酶干粉以30-100单位/毫升的浓度溶解于步骤(5)制得的盐溶液中，到充分溶解止，制得酶溶液；

(7)将步骤(6)所得酶溶液经过0.2μm滤膜过滤灭菌后，取样测试；测试参数：

A、30-37℃条件下pH值：7.1-7.4；

B、渗透压：270-290mOsm/Kg；

C、内毒素：＜1.0EU/ml；

D.一细胞鼠胚培养到96小时：≥80％的囊胚形成率；

(8)将配置好的酶溶液在百级GMP车间进行无菌分装和标签。