[发明专利]一种浓缩液磷酸盐缓冲液的配置方法

说明书

本发明公开了一种浓缩液磷酸盐缓冲液的配置方法，包括如下步骤：(1)装3L水于5L量杯中，把量杯置于磁力搅拌器上，设定搅拌频率为40‑50HZ，搅拌速度为100转/分钟，让搅拌转子匀速转动起来；(2)然后依次往所述5L量杯中加入经过200℃，2小时干燥处理过的磷酸二氢钾，二水合磷酸氢二钠，氯化钾，硝酸钠，EDTA‑2Na，TritongX‑100，K40，每次加入一种化学品都必须待所述缓冲液完全溶解后再次加入下一个化学品；(3)等上述化学品都完全溶解后，然后再往5L量杯中加水至刻度线处；(4)溶解均匀后，即得灌装前溶液，在过滤器中放入三蒸水中浸泡过的0.22um的醋酸纤维滤膜，过滤三次，即为需要的系统液。本发明配置过程不会产生大量泡沫。

技术领域

本发明涉及一种浓缩液磷酸盐缓冲液的配置方法。

背景技术

浓缩液主要成分是磷酸缓冲盐溶液(phosphate buffer saline)一般作 为溶剂，起溶解保护试剂的作用。它是生物化学研究中使用最为广泛的一种 缓冲液，主要成分为Na2HPO4.2H2O、KH2PO4、NaNO3、KCL等，作为体外诊 断试剂所用的10倍浓缩液，所以研究其技术指标主要涉及的是PH值和电导 率，再根据相关技术，发现PH值在6.8-7.3，电导率在42-44ms/cm范围的 10倍浓缩液按照1:9加水稀释成系统液对于测试血糖和乳酸得出的测试结 果更加符合标准，并且CV≤2.0％。其中PH值，由于二水合磷酸氢二钠和磷 酸二氢钾它们有二级解离，缓冲的pH值范围很广，针对浓缩液的PH值原理 分析如下：根据现有的各原材料的含量，进行溶解配置，原理及作用：用于 葡萄糖/乳酸分析仪、分子克隆及细胞培养，pH＝7.4，与人体血液等渗，磷 酸盐缓冲液是由磷酸二氢钾和二水合磷酸氢二钠组成的溶液，用于样品的稀 释，其中磷酸二氢钾酸性较强，二水合磷酸氢二钠碱性较强。如果血液中的 ph值过高的话，多余的碱就会与酸磷酸二氢钾结合生成磷酸氢二钠，反之， 过酸时就会与磷酸氢二钠反应产生磷酸二氢钾，这样PH值就会稳定在一定 的范围内：

H₂PO₄^-＝H⁺+HPO₄^2-

(足量共轭酸 (足量共轭碱

主要来自 主要来自

KH₂PO₄) Na₂HPO₄.H₂O)

HPO₄^2-是抗酸成分，通过平衡移动能对抗加酸的影响。H₂PO₄^-是抗碱成分， 通过平衡右移对抗外加碱的影响；而对于试剂溶液的电导率，市场上磷酸盐 缓冲溶液一般采用溶剂为注射用水、0.004％的磷酸二氢钠、0.028％的磷酸氢 二钠、0.09％的氯化钠的配方，该方法生产的缓冲溶液渗透压达到 280-320smol/L，符合国家标准规定的250smol/L-350smol/L,但是偏上限， 在临床上不良反应较多，同时细胞内液和外液之间保持着一个平衡状态，以 防出现问题，打破内在环境的稳定，对机体产生不利影响。电导率和渗透压 是调节细胞内外体液环境稳定的重要因素之一，其高低变化直接影响机体的 生理功能和代谢活动，高渗透压改变了药物的浓度和酸碱度，通过临床注射， 因此在配液过程中及时考虑具体考虑试剂对渗透压的影响，在符合国家标准 的过程中，向临床提供等渗和等张浓度的溶液，已尽可能的避免不良结果产 生，所以电导率是10倍浓缩液一个不可忽视的技术因素，它直接影响测试 用血细胞的渗透压，即影响在血糖分析仪等仪器上对结果测试的判断，成 分中NaNO3、KCL、EDTA-2Na.2H2O主要作用为增加盐离子浓度，电导率大小 的因素主要也是物质在水中电离出的部分，不电离的部分是不需要计算得， 所以采用电极常数为0.1-1.0的电极棒，测试多组配置出的浓缩液的电导率 数据，可以得到浓缩液的电导率指标约为42-45ms/cm，符合国外行业内浓缩 液的使用标准。