[发明专利]一种金刚烷胺残留的快速检测试剂盒及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种金刚烷胺残留的快速检测试剂盒，其包括检测卡和荧光试剂微孔，其中：

所述检测卡包括试纸条和用于容纳所述试纸条的外壳，所述试纸条包括底板、样品垫、层析膜和吸水垫，其中：

所述底板上依次固定有所述样品垫、层析膜和吸水垫，所述样品垫的始端与所述底板的始端对齐，所述样品垫的末端与所述层析膜的始端相连，所述层析膜的末端与所述吸水垫的始端相连，所述吸水垫的末端与所述底板的末端对齐；

所述层析膜的基材上设置有用于包被金刚烷胺-载体蛋白偶联物的检测区和用于包被羊抗鼠二抗的质控区，所述检测区位于接近所述样品垫的一侧，所述质控区位于远离所述样品垫的一侧；

所述外壳上设置有加样孔和观察孔；当所述外壳中容纳有所述试纸条时，所述加样孔位于所述样品垫的上方，所述观察孔位于所述层析膜的上方，并且通过所述观察孔能够观察到所述检测区和所述质控区；

所述荧光试剂微孔包括金刚烷胺单克隆抗体标记的时间分辨荧光微球和用于容纳所述金刚烷胺单克隆抗体标记的时间分辨荧光微球的可密封容器；

所述金刚烷胺-牛血清白蛋白偶联物由3-氨基-1-金刚烷醇和BSA载体蛋白经偶联反应制成，具体过程如下：

称取3mg 3-氨基-1-金刚烷醇和20mg N,N'-羰基二咪唑，溶解于无水1mL DMF中，室温密封避光，磁力搅拌过夜，此为A液；将10mg BSA溶解于pH＝9.6的5mL、0.05M碳酸盐缓冲液中，然后在磁力搅拌条件下逐滴加入所述A液，室温密封避光，磁力搅拌过夜；收集反应后的溶液，装入处理好的透析袋中，在0.01MPBS中透析，每8h换液一次，总共换液6次；收集透析袋中液体，采用商品化BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度，分装后于-20℃保存，得到所述金刚烷胺-牛血清白蛋白偶联物。

2.根据权利要求1所述的金刚烷胺残留的快速检测试剂盒，其特征在于：

所述外壳由聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚碳酸酯、聚丙烯或聚乙烯制成；

所述底板由聚氯乙烯或聚苯乙烯制成；

所述样品垫由玻璃纤维、聚酯纤维、吸水滤纸或滤血膜制成；

所述层析膜的基材由硝酸纤维素膜制成；

所述吸水垫由吸水纸制成。

3.根据权利要求1所述的金刚烷胺残留的快速检测试剂盒，其特征在于：

所述金刚烷胺单克隆抗体通过如权利要求1所述的金刚烷胺-牛血清白蛋白偶联物作为免疫原对小鼠进行免疫而获得。

4.根据权利要求1所述的金刚烷胺残留的快速检测试剂盒，其特征在于：

所述时间分辨荧光微球为内部包裹含铕配合物、外部修饰羧基官能团的聚苯乙烯微球。

5.根据权利要求4所述的金刚烷胺残留的快速检测试剂盒，其特征在于：

所述时间分辨荧光微球的直径为100～300nm，激发波长为365nm，发射波长为610nm。

6.根据权利要求1所述的金刚烷胺残留的快速检测试剂盒，其特征在于：

所述可密封容器为采用锡箔纸不干胶进行密封的酶标板。