[发明专利]一种提高作物抗盐性的海洋寡糖生物制剂及其制备方法

权利要求书

1.一种提高作物抗盐性的海洋寡糖生物制剂，其特征在于，各组分组成包括分子量为3000-4000的甲壳低聚糖、聚合度4-8的龙须菜琼胶寡糖、胶冻样芽孢杆菌发酵液、氯化钙，按质量配比计算，3000-4000的甲壳低聚糖：聚合度4-8的龙须菜琼胶寡糖比值为（1-3）:0.5，氯化钙浓度为10-20 mmol/L，聚合度4-8的龙须菜琼胶寡糖含量≥0.2%，胶冻样芽孢杆菌发酵液有效活菌数≥2亿/mL，其余为水；

所述分子量为3000-4000的甲壳低聚糖是利用淡紫拟青霉（Paecilomyces lilacinus）三炬03号菌种为发酵菌，以虾蟹壳为原料，通过微生物发酵生产得到的发酵上清液，经过膜过滤得到的分子量为3000-4000的甲壳低聚糖；淡紫拟青霉（Paecilomyces lilacinus）三炬03号菌种已于2010年6月30日收藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:M2010165；所述胶冻样芽孢杆菌为胶冻样芽孢杆菌（Bacillus mucilaginosus）三炬01菌株，已于2015年10月24日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏登记入册编号为CGMCC NO.3995。

2.如权利要求1所述的一种提高作物抗盐性的海洋寡糖生物制剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

1）制备甲壳低聚糖溶液

将淡紫拟青霉（Paecilomyces lilacinus）三炬03号菌种孢子液，涂布于PDA平板上培养，再用无菌生理盐水将PDA平板上的淡紫拟青霉（Paecilomyces lilacinus）三炬03号菌种的孢子洗涤下来，制成孢子悬液；将孢子悬液接种到种子培养基中得到种子液；再将种子液接种到含虾蟹壳原料的发酵培养基中发酵培养48-72 h得到淡紫拟青霉发酵液；将淡紫拟青霉发酵液离心除去菌体，获得上清液，浓缩，制得含量10%-15%的分子量3000-4000的甲壳低聚糖溶液；

2）制备胶冻样芽孢杆菌发酵液；

配置无氮固体培养基，将胶冻样芽孢杆菌（Bacillus mucilaginosus）三炬01菌株接种到无氮固体培养基进行划线培养，将无氮固体培养基上活化好的胶冻样芽孢杆菌（Bacillus mucilaginosus）三炬01菌株转接至无氮液体培养基中，培养得到一级种子液，将一级种子液接种至种子发酵罐中，培养得到二级种子液；将种子液接种至发酵培养基中发酵，制得胶冻样芽孢杆菌发酵液；

3）制备提高作物抗盐性的海洋寡糖生物制剂

将步骤1）所得的甲壳低聚糖溶液与龙须菜琼胶寡糖溶液按质量比（1-3）:0.5加入步骤2所制得的胶冻样芽孢杆菌发酵液中，并控制寡糖浓度≥0.2%，同时加入氯化钙，使氯化钙终浓度为10-20 mmol/L，搅拌混合均匀，即得一种提高作物抗盐性的海洋寡糖生物制剂。

3.如权利要求2所述的一种提高作物抗盐性的海洋寡糖生物制剂的制备方法，其特征在于，步骤3）中，所述龙须菜琼胶寡糖是利用微生物直接降解龙须菜所得的聚合度为4～8的寡糖。

4.如权利要求1所述的一种提高作物抗盐性的海洋寡糖生物制剂在辣椒浸种中或促进黄瓜、水稻种子萌发和幼苗生长的应用。