[发明专利]一种碳量子点靶向检测溶酶体中H2S的方法有效
申请号: | 201710045779.2 | 申请日: | 2017-01-20 |
公开(公告)号: | CN106872427B | 公开(公告)日: | 2019-04-30 |
发明(设计)人: | 束庆海;吴小雪;李丽洁;陈树森;牛虎;赵帅;赵思维 | 申请(专利权)人: | 北京理工大学 |
主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64 |
代理公司: | 北京理工正阳知识产权代理事务所(普通合伙) 11639 | 代理人: | 毛燕 |
地址: | 100081 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 量子 靶向 检测 溶酶体 h2s 方法 | ||
1.一种碳量子点靶向检测溶酶体中H2S的方法,其特征在于:具体步骤如下:
步骤一、用pH=5.0的甘氨酸缓冲液,将碳量子点CD-dopa-morph配置成已知浓度的碳量子点分散液;
步骤二、将上述分散液转移到石英比色皿中,配置500μM浓度的NaHS储备液,每次加入储备液并进行荧光强度测试,保证每次加入后能够形成0.1μM、0.2μM、0.3μM、0.4μM、0.5μM、0.6μM、0.7μM、1μM、2μM、3μM、4μM的浓度梯度,所述加入的储备液总体积不大于石英比色皿中分散液总体积的5%;
步骤三、根据步骤二中不同浓度的H2S对探针荧光发射光谱影响,确定荧光发射光谱575nm处荧光强度与H2S浓度的对应关系,在H2S含量为0-0.7μM区间内,拟合出一条定量检测H2S的标准方程y=a+bx,其中y为所测的含H2S的探针在最大发射峰575nm位置处对应的荧光强度,x为样品中含有的H2S的含量,单位:μM,a=-0.06046,b=1.34316;
步骤四、将含有H2S的待测液样品加入到已知碳量子点CD-dopa-morph探针浓度的pH=5.0的甘氨酸缓冲液中,测定荧光光谱,将所测得样品在575nm位置处对应的荧光强度数值带入步骤三中所得的H2S定量标准方程中,可以定量确定样品中H2S的含量;
所述碳量子点CD-dopa-morph的化学结构式如下:
2.如权利要求1所述的一种碳量子点靶向检测溶酶体中H2S的方法,其特征在于:步骤一所述的碳量子点CD-dopa-morph的合成方法为:
在容器中加入甲醇和二氯甲烷混合液,所述甲醇和二氯甲烷体积比为3:1,用氮气鼓泡2h,除去溶剂中的氧气;加入碳量子点C-dots,dopa-quione-ITC和morph-ITC,三者的质量比为1:1:1,搅拌,黑暗条件下反应24h,然后将粗产物溶剂旋蒸掉;将粗产物通过硅胶柱色谱法,利用二氯甲烷和甲醇作为洗脱液进一步提纯,所述二氯甲烷和甲醇的体积比50:1,得到黄绿色产物,再减压浓缩、减压真空干燥最终得到产物黄色粉末CDs-dopa-morph产率50%左右。
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