[发明专利]一种测定硫辛酸注射液中乙二胺含量的方法

说明书

本发明公开了一种测定硫辛酸注射液中乙二胺含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：1)流动相的制备；将磷酸氢二钾溶液用磷酸调节pH值至9.0后，过滤，加入乙腈，混匀后进行超声处理，得到流动相；2)对照品溶液的制备；将称量好的乙二胺置于容器中，加水稀释，得到浓度范围为3.75mg/ml～11.25mg/ml的乙二胺溶液；3)供试品溶液的制备；取硫辛酸注射液样品溶液，作为供试品溶液；4)测定；将步骤2)中得到的对照品溶液注入液相色谱仪进行测定，得到标准曲线；将步骤3)中得到的供试品溶液，注入液相色谱仪进行测定；所述测定过程中：色谱柱为waters X‑bridge Amide 4.6mm×150mm，3.5μm；流速为0.8ml/min～1.2ml/min；柱温为30℃～40℃；进样量为10μl；采集时间为15min；检测器为示差折光检测器；检测器温度为40℃。

技术领域

本发明涉及检测方法领域，具体是一种测定硫辛酸注射液中乙二胺含量的方法。

背景技术

硫辛酸，亦称α-硫辛酸，最早是从猪肝脏中分离提取的一种类维生素物质，具有很强的抗氧化活性，目前可通过化学合成得到。在临床上使用硫辛酸治疗糖尿病神经病变已有40余年历史。目前硫辛酸在国内外广泛应用，在我国，硫辛酸注射液作为处方药在临床上用于治疗糖尿病周围神经病变引起的感觉异常症状。

原研的硫辛酸注射液为德国进口(商品名：奥力宝)，其处方组成为硫辛酸、助溶剂乙二胺与注射用水。硫辛酸水中溶解度小，乙二胺作为助溶剂可以有效增加其溶解度，并能提高硫辛酸注射液热稳定性效果。乙二胺的使用量对于产品的热稳定性很关键。

因此准确测定原研药中乙二胺的含量，对仿制硫辛酸注射液非常重要。

目前有文献报道采用气相色谱仪测定氨茶碱及其制剂中乙二胺的含量，但经试验证明，该方法并不适用于硫辛酸注射液中乙二胺含量测定，其原因为乙二胺与硫辛酸结合成盐，加入强碱后仍无法有效解离。

发明内容

本发明的目的是解决现有技术中，乙二胺在原研药中的含量难以准确测定等问题。

为实现本发明目的而采用的技术方案是这样的，一种测定硫辛酸注射液中乙二胺含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)流动相的制备

将磷酸氢二钾溶液用磷酸调节pH值至9.0后，过滤，加入乙腈，混匀后进行超声处理，得到流动相；

所述磷酸氢二钾溶液的浓度范围为1.14g/L～3.42g/L；

所述磷酸氢二钾溶液和乙腈的体积比为(750～850)︰(150～250)；

2)对照品溶液的制备

将称量好的乙二胺置于容器中，加水稀释，得到浓度范围为3.75mg/ml～11.25mg/ml的乙二胺溶液；

所述对照品溶液的浓度为C1；

3)供试品溶液的制备

取硫辛酸注射液样品溶液，作为供试品溶液；

所述供试品溶液的浓度为C2；

4)测定

4.1)将步骤2)中得到的对照品溶液和将步骤3)中得到的供试品溶液，分别注入液相色谱仪进行测定，得到对照品溶液和供试品溶液的高效液相色谱检测结果；

所述测定过程中：色谱柱为waters X-bridge Amide 4.6mm×150mm，3.5μm；

流速为0.8ml/min～1.2ml/min；柱温为30℃～40℃；进样量为10μl；采集时间为15min；检测器为示差折光检测器；检测器温度为40℃；