[发明专利]丙型肝炎病毒E1/E2异二聚体及其生产方法

权利要求书

1.一种用于制备丙型肝炎病毒(HCV)E1/E2异二聚体的经亲和标记的异二聚体多肽，所述HCV E1/E2异二聚体诱导对HCV的中和抗体应答，

其中所述经亲和标记的异二聚体多肽由以下(a)和(b)组成：

(a)HCV E1多肽；和

(b)经亲和标记的HCV E2融合多肽，

其中所述经亲和标记的HCV E2融合多肽按从N-末端到C-末端的顺序包含：

(i)亲和标记多肽，其中所述亲和标签多肽是免疫球蛋白(Ig)Fc多肽；

(ii)蛋白水解可切割接头；和

(iii)HCV E2多肽。

2.根据权利要求1所述的异二聚体多肽，其中：

(a)所述蛋白水解可切割接头包含序列LEVLFQGP(SEQ ID NO:1)，其中切割在谷氨酰胺和甘氨酸之间进行；

(b)所述蛋白水解可切割接头包含序列ENLYFQS(SEQ ID NO:2)，其中切割在谷氨酰胺和丝氨酸之间进行；

(c)所述蛋白水解可切割接头包含序列DDDDK(SEQ ID NO:3)，其中切割紧邻赖氨酸残基的C-末端进行；或者

(d)所述蛋白水解可切割接头包含序列I(E/D)GR(SEQ ID NO:45)，其中切割紧邻精氨酸残基的C-末端进行；

(e)所述蛋白水解可切割接头包含序列LVPRGS(SEQ ID NO:5)；或者

(f)所述蛋白水解可切割接头包含序列ENLYFQG(SEQ ID NO:43)，其中切割在谷氨酰胺和甘氨酸之间进行。

3.根据权利要求1或2所述的异二聚体多肽，其中所述HCV E2多肽来自SEQ IDNO:46～101中的一个所示的氨基酸序列。

4.根据权利要求1或2所述的异二聚体多肽，其中所述HCV E1多肽来自SEQ IDNO:46～101中的一个所示的氨基酸序列。

5.根据权利要求1所述的异二聚体多肽，其中所述Ig Fc多肽由SEQ ID NO:102～109中的一个所示的氨基酸序列组成。

6.根据权利要求1所述的异二聚体多肽，其中所述经亲和标记的HCV E2多肽按从N-末端到C-末端的顺序包含：

(i)HCV E2多肽的N-末端的2至15个氨基酸；

(ii)所述亲和标记多肽，

(iii)所述蛋白水解可切割接头；和

(iv)HCV E2多肽。

7.根据权利要求6所述的异二聚体多肽，其中HCV E2多肽的N-末端的2至15个氨基酸是选自QT、ET、HT、GT、TT、RH、NT、AY、VI和ST的二肽。

8.根据权利要求1所述的异二聚体多肽，其中所述HCV E2多肽和所述HCV E1多肽具有相同的基因型。

9.根据权利要求1所述的异二聚体多肽，其中所述HCV E2多肽和所述HCV E1多肽具有不同的基因型。

10.根据权利要求1所述的异二聚体多肽，其中所述HCV E2多肽具有基因型1、2、3、4、5、6或7。

11.根据权利要求1所述的异二聚体多肽，其中所述HCV E1多肽具有基因型1、2、3、4、5、6或7。

12.一种组合物，其包含：

(a)权利要求1至11中任一项所述的异二聚体多肽，及

(b)药学上可接受的赋形剂。

13.一种核酸，其包含编码权利要求1至11中任一项所述的经亲和标记的异二聚体多肽的核苷酸序列。

14.根据权利要求13所述的核酸，其中编码所述经亲和标记的异二聚体多肽的核苷酸序列可操作地连接至启动子。