[发明专利]用于免疫测定的细小病毒的碱预处理

说明书

本发明涉及检测来自受试者的样品中无包膜病毒的衣壳多肽的方法，包括(a)使所述样品与碱接触，和(b)检测所述样品中的所述病毒的衣壳多肽。此外，本发明涉及预处理来自受试者的样品以检测病毒的方法，其包括使所述样品与碱接触。此外，本发明涉及与所述方法有关的试剂盒、用途和装置。

发明领域

本发明涉及用于检测来自受试者的样品中无包膜病毒的衣壳多肽的方法，包括(a)使所述样品与碱接触，和(b)检测所述样品中的所述病毒的衣壳多肽。此外，本发明涉及用于预处理来自受试者的样品以检测病毒的方法，其包括使所述样品与碱接触。此外，本发明涉及与所述方法有关的试剂盒、用途和装置。

相关技术

与大多数包膜病毒相反，无包膜病毒的稳健性及其对环境影响(包括热、酸、洗涤剂等)的相对不敏感性是众所周知的。结果，发现难以分解无包膜病毒以获得病毒的组成分子来检测无包膜病毒的存在。

一组无包膜病毒的例子，细小病毒，是小的无包膜病毒，其具有包装成衣壳的线性、非节段的、单链DNA基因组。细小病毒的衣壳基本上由2至4个衣壳蛋白组成，分别称为VP1至VP2或VP1至VP4。衣壳蛋白从病毒基因组的开放阅读框中表达，其中至少一部分对于所有VP蛋白是相同的，使得VP蛋白的氨基酸序列部分相同。已知细小病毒对其衣壳具有特殊的稳定性，对宽范围的pH值、溶剂和温度不敏感(例如Yuan和Parrish(2001)，Virology279：546)。

灵长类红细胞病毒(erythroparvovirus)1(细小病毒B19)作为感染人类的红细胞病毒属的成员，是传染性红斑的病原体，也称为“第五病”。该疾病的症状包括病毒感染的典型症状，如发热、头痛、恶心和腹泻。这些通常跟随有红色皮疹，特别是在脸颊上，通常不包括鼻唇沟、前额和嘴；以及在躯干和/或四肢上的红色皮疹。孕妇的细小病毒B19感染尤其关键，因为它可能导致胎儿水肿和贫血的发生。

细小病毒B19感染的免疫学诊断通常在血液样品中进行，检测病毒衣壳蛋白。所使用的方法包括样品的酸性预处理，旨在分解病毒颗粒以增加测定的灵敏度(WO2008/072216)。为了相同的目的也使用离液盐(JP 2007-278902)。然而，酸处理引起可逆的变性，使病毒颗粒至少部分重新组装。此外，来自血液样品的潜在混杂的免疫球蛋白也可能复性，因此不能被有效除去。离液盐可能会干扰检测反应，并且如果被除去，则可能会使衣壳和混杂物复性。此外，它们的使用在包含不锈钢模块的装置中可能是关键的，因为它们会导致腐蚀。

要解决的问题

因此，本发明的目的是提供检测细小病毒的改进手段和方法。

发明概述

该问题是通过具有独立权利要求的特征的本发明的手段和方法解决。在从属权利要求中列出了可以以分离的方式或以任意组合的方式实现的优选实施方案。

因此，本发明涉及用于检测来自受试者的样品中的无包膜病毒的衣壳多肽的方法，包括

(a)使所述样品与碱接触，和

(b)检测所述样品中的所述病毒的所述衣壳多肽。

如下文中所使用的，术语“具有”、“包括”或“包含”或其任何任意的语法变体以非排他的方式使用。因此，这些术语可以指的是除了由这些术语引入的特征之外在该上下文中描述的实体中不存在另外的特征的情况，以及存在一个或多个另外的特征的情况。作为例子，表述“A具有B”、“A包括B”和“A包含B”都可以指的是除了B之外在A中不存在其他要素的情况(即，A唯一地并且排他地由B组成)，以及除了B之外在实体A中存在一个或多个另外的要素(例如要素C、要素C和D乃至另外的要素)的情况。