[发明专利]luterion及其分离和培养方法

说明书

技术领域

本公开涉及作为线粒体样微物质的luterion，及其分离和培养方法，并且更特别地，涉及使用具有特定尺寸的孔径的过滤器分离luterion的方法，以及培养和增殖由所述过滤收集的所分离的luterion的方法。

现有技术说明

本发明的发明人开发了一种有效分离luterial(存在于患者或正常人排出的体液中的微物质)方法，并澄清了所分离的luterial的特征，于2014年5月9日提交了专利申请(见WO2015/108246)。此外，发现可以通过观察存在于从患者预先排出的体液中的微物质的特性而进行疾病的诊断和预测，并且专利申请于2014年1月14日提交(见WO2015/005553)。

所述luterial(1)是具有原核细胞和真核细胞之间中期融合特性的细胞或细胞类似物；(2)存在于诸如血液、精液、浆液、唾液以及细胞溶胶的体液中；(3)在免疫荧光试验中表现对于詹纳斯绿B(Janus green B)、吖啶橙(Acridine orange)以及罗丹明123(Rhodamine 123)的阳性显色反应；(4)在最佳环境(pH 7.2-7.4)下表现源于β-变形菌和γ-变形菌的基因的表达特性，并且具有30nm至800nm的尺寸；(5)在酸化环境中：不仅表现源于β-变形菌和γ-变形菌的基因的表达特性而且表现源于真核细胞的基因的表达特性，表达主要与链型植物(sterptophyta)基因同源的基因，从400nm以上增大其尺寸至2000nm以上；(6)在常规条件下参与ATP产生；以及(7)是不同于线粒体以及完全不同于外来体的细胞或细胞类似物。

luterial主要存在于动物包括人类的血液中。同时，证实luterion(这样被命名以区别于luterial的微物质)也存在于植物或食物中，具有与luterial相似的结构和功能。

在这些技术背景下，本申请的发明人发现，由于集中努力地有效分离和培养便于临床适用的luterion，本发明的发明人成功收集了通过添加溶剂至植物或食物中并煮沸而产生的蒸发气体。此后，包含在所述蒸发气体中的luterion可以通过过滤和离心而有效分离，并且由此分离的luterion可以在特定条件和培养基中培养，从而实现本公开。

发明内容

本公开的目的是提供luterion。

本公开的另一个目的是提供一种使用具有特定孔径的过滤器有效分离用于临床应用的luterion的方法。

本公开的还一个目的是提供一种有效培养luterion的方法。

为了实现上述目的，本公开提供具有选自如下特性中的至少一种特性的luterion：

(a)具有50nm至800nm尺寸的圆形或椭圆形，并且具有迁移性；

(b)具有核酸；

(c)当免疫化学荧光染色时显示与线粒体相似的反应；

(d)表现融合和/或分裂生态型；

(e)在不融合的情况下成熟至尺寸达500nm，成熟成含有DNA的假线粒体，在通过扫描电子显微镜(SEM)或透射电子显微镜(TEM)获得的图像上显示线粒体样结构；

(f)显示不同于外来体的光反应；

(g)当红外线(IR)辐射或加压时经历分裂；

(h)表达作为表面抗原的CD332、CD133、CD73或CD39；

(i)表现自发荧光：

(j)产生400nm或更小尺寸的ATP；

(k)双膜结构或多膜结构；

(l)具有粘附性：

(m)抑制癌细胞的端粒酶活性；

(n)促进正常细胞的端粒酶活性；

(o)具有细胞渗透性；以及

(p)具有血脑屏障(BBB)渗透性。

本公开提供一种分离luterion的方法，其包括如下步骤：(a)煮沸溶剂中的植物或食物，通过冷却蒸发的luterion获得冷凝液，并且使用具有0.8μm至1.2μm孔径的过滤器过滤所述冷凝液；

(b)离心所过滤的冷凝液；以及

(c)从所离心的上清液中分离所述luterion。

本公开还提供另一种分离luterion的方法，所述方法包括如下步骤：(a)将具有特异性结合luterion表面抗原的抗体或适体表面表达的颗粒添加至包含所述luterion的提取物，以诱导所述颗粒与luterion的结合；以及(b)回收与所述颗粒结合的luterion。