[实用新型]多膜片蛋白质印迹杂交仪有效
申请号: | 201621452911.9 | 申请日: | 2016-12-26 |
公开(公告)号: | CN206300955U | 公开(公告)日: | 2017-07-04 |
发明(设计)人: | 王宇;李郁;郁国宏 | 申请(专利权)人: | 兰州奥润环保设备有限公司 |
主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68;G01N33/543 |
代理公司: | 北京酷爱智慧知识产权代理有限公司11514 | 代理人: | 孟凡臣 |
地址: | 730030 *** | 国省代码: | 甘肃;62 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 膜片 蛋白质 印迹 杂交 | ||
技术领域
本实用新型涉及蛋白印迹实验设备领域,具体涉及一种多膜片蛋白质印迹杂交仪。
背景技术
蛋白质印迹杂交(Western blot)是生物学实验中最为常用的技术之一,实验操作主要是在凝胶电泳的基础上,将电泳分离的蛋白质组分从凝胶转移至一种固相支持体上,通过抗体与附着于固相支持物的靶蛋白所呈现的抗原表位发生特异性免疫反应,之后进行染色检测的过程。
其中让抗体与靶蛋白发生特异性免疫反应的蛋白质杂交过程可以细分为封闭、杂交孵育和洗脱三步,即将电泳转膜后的PVDF膜(即聚偏二氟乙烯膜)置于含脱脂奶粉或牛血清白蛋白(BSA)的封闭液中,慢速摇动封闭,持续时间40-60分钟;之后在含第一抗体的一抗孵育液中慢速摇动进行一抗孵育,持续时间60分钟;然后用洗脱液快速摇动洗脱3次,每次5-10分钟;再然后在含第二抗体的二抗孵育液中慢速摇动进行二抗孵育,持续时间40分钟;最后用洗脱液快速摇动洗脱3次,每次5-10分钟,得到符合要求的蛋白膜。其过程十分繁琐,持续操作时间长,且需要机械性的多次重复操作,花费实验人员很多的时间和精力,却每次只能对一张PVDF膜片进行实验,效率低的同时不能满足有些需要多膜片同时实验的实验需求;同时,人为操作的不稳定也容易造成试验结果的差异,造成实验结果的不准确。
目前已经有全自动的蛋白质印迹杂交仪,能够直接上样,一体完成蛋白电泳、转膜、杂交、染色的全过程,得到稳定的实验结果,极大的减轻了实验人员的工作强度。只是,这类仪器价格十分昂贵,而且耗材也很贵,既使对于拥有较多科研经费的实验室,相关的费用也难以承担;而且,多数的仪器仍然只能进行单片PVDF膜片的杂交试验,实验效率低,不能满足有些需要多膜片同时实验的实验需求,适用范围窄,支持多膜片同时实验的仪器,仪器价格又会在本就昂贵的价格上再次提高。因此,如何在节约实验成本的情况下,提高实验的自动化程度和工作效率,实现多膜片同时实验,减轻实验人员的工作强度,具有非常积极的意义。
实用新型内容
为解决上述问题,本实用新型仅针对蛋白质印迹杂交实验中最繁琐的杂交过程,提出的一种多膜片蛋白质印迹杂交仪,其结构简单,操作方便,支持多膜片同时实验,能够减轻实验人员工作强度的同时,提高工作效率,降低实验成本。
一种多膜片蛋白质印迹杂交仪,包括:底座以及从底座后部向上延伸的立座,还包括:传动定位装置、摇床装置、杂交槽组和进排液装置,所述传动定位装置设置在立座内,所述摇床装置设置在底座内,所述摇床装置的上部设置所述杂交槽组,所述杂交槽组突出于底座的上表面,并与所述进排液装置通过管线连接。所述传动定位装置,包括:横移机构,所述横移机构上安装有滑块,并驱动所述滑块做往复的左右运动;所述滑块上安装有垂直于所述立座并水平向前延伸的提放机构,所述提放机构的前部安装有膜片夹,并带动所述膜片夹做往复的上下运动。所述摇床装置,包括:固定在底座内的摇床机构和安装在摇床机构上部的槽架,所述杂交槽组垂直、可拆卸的安装在所述槽架上。所述杂交槽组包括十个独立的槽体,十个所述槽体成排布置:第一排设置一个用于盛装封闭液的封闭液槽;第二排并排设置四个用于盛装一抗孵育液的一抗杂交槽,且四个所述一抗杂交槽的长度之和等于所述封闭液槽的长度;第三排设置一个长度与所述封闭液槽的长度相同的洗脱槽,用以盛装洗脱液;第四排并排设置四个用于盛装二抗孵育液的二抗杂交槽,且四个所述二抗杂交槽的长度之和等于所述封闭液槽的长度。所述进排液装置,包括:蠕动泵,所述蠕动泵的出口端通过管线与所述洗脱槽一端的进口相连,蠕动泵的入口端通过管线连入装有洗脱液的容器;所述洗脱槽另一端的出口通过排液管线接入废液池中。
向各个槽体中加入相应的试剂液体后,将转膜完成的PVDF膜片夹持到膜片夹上,本仪器最多可同时进行四片相同或不同的PVDF膜片的杂交实验,满足有些需要多膜片同时实验的需求,同时提高实验效率;之后,在传动定位装置的作用下,将膜片横移到槽体的上方,并提放浸入试剂内完成实验过程:膜片先浸入封闭液槽进行封闭,然后浸入一抗杂交槽完成一抗孵育,之后浸入洗脱槽洗脱,再后浸入二抗杂交槽进行二抗孵育,最后返回洗脱槽进行最后的洗脱,完成杂交过程。
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