[发明专利]一种聚肽的快速检测方法

权利要求书

1.一种聚肽的快速检测方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)样品溶液的配制：取发酵液或发酵菌体破碎液或纯化中间过程溶液适量，过0.22μm滤膜；

(2)样品的测定：采用高效液相离子交换色谱法，以10-30mM的Na₂HPO₄-NaH₂PO₄缓冲溶液或K₂HPO₄-KH₂PO₄缓冲溶液或Tris-HCl缓冲溶液作为洗脱液A，调pH至7.5-8.5，以洗脱液A为溶剂配制1-3M的NaCl溶液或KCl盐溶液为洗脱液B；

所述离子交换色谱条件为：填料Q Sepharose^TM FF装填于空管柱或使用预装柱；柱温：25℃；进样量：10μL；流速：0.1-2mL/min；洗脱方式：0-10min，100％A等度洗脱；10-25min，洗脱液A:洗脱液B为90:10；25-45min，洗脱液A:洗脱液B为80:20；45-60min，洗脱液A:洗脱液B为70:30；60-80min，100％B等度洗脱，之后通过双波长紫外检测器检测；

(3)含量分析；

其中，所述聚肽为盐型阴离子聚肽，所述盐型阴离子聚肽包括α-聚谷氨酸、γ-聚谷氨酸、聚天冬氨酸以及由谷氨酸和天冬氨酸所形成的聚肽的盐。

2.根据权利要求1所述的聚肽的快速检测方法，其特征在于，所述含量分析为根据标准曲线法进行聚肽的含量计算。

3.根据权利要求2所述的聚肽的快速检测方法，其特征在于，所述标准曲线法为：称取聚肽标准品，溶于洗脱液A中，配制成一定浓度的标准溶液，分别稀释成一定浓度梯度的稀释液，过0.22μm滤膜，分别进行检测，以标准溶液的质量浓度为横坐标，色谱峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。

4.根据权利要求1所述的聚肽的快速检测方法，其特征在于，所述的离子交换空管柱或预装柱内径为2-20mm，长度为20-100mm，总体积为1-25mL。

5.根据权利要求1所述的聚肽的快速检测方法，其特征在于，所述的双波长检测，其中一个检测通道波长设置为205-230nm，用于检测不含苯环的蛋白类物质，另一个检测通道波长设置为250-280nm，用于检测核酸类和含苯环的蛋白类物质。

6.根据权利要求5所述的聚肽的快速检测方法，其特征在于，所述不含苯环的蛋白类物质包括聚肽。