[发明专利]一种纳米多向层析核酸提取介质及其制备方法

说明书

本发明揭露一种纳米多向层析核酸提取介质，其具有高分子碳水化合物的基材与渗入所述基材中提取物，该提取物包括第一层的盐酸胍、SDS、EDTA混合物，位于第二层保护剂，位于第三层的盐酸胍、SDS、EDTA混合物及位于第四层的保护剂，所述第一层的盐酸胍、SDS、EDTA混合物与第三层的盐酸胍、SDS、EDTA混合物含量不同。基材可以很好的保存核酸的完整性，防止核酸的降解。

技术领域

本发明涉及一种核酸提取材料，尤其涉及一种纳米多向层析核酸提取介质及其制备方法。

背景技术

目前，核酸提取的原则一般为.保证核酸一级结构的完整性，排除其它分子的污染。核酸提取应注意的问题：简化步骤，缩短提取时间，减少化学因素对核酸的降解，减少物理因素对核酸的降解：机械剪切力和高温，防止核酸的生物降解，核酸提取大致分为3大部分：破碎、提取、纯化。

在破碎、提取前，现有的技术为用不同的容器收集/采集各种液体样本，再将液体样本运送至特定地点(实验室)进行处理，如此，液体样本运输的条件要求比较苛刻，而且液体样本暴露在空气中的时间较长，可能会导致液体样本降解。另外，液体样本在运输过程中，容易挥发，也易污染、变性、腐败、或仍有潜在传染风险，容易造成病毒、细菌传播，传染给其他人。

核酸的提取，现有的技术为将待检测液体样本分步滴入各液态提取介质上，分多步在液态提取介质上完成破碎、提取、纯化，得到的核酸亦为液态。步骤较为复杂，另外，液态核酸保存、运输的条件要求比较苛刻，而且液态核酸保存过程中会发生降解，导致后期的检测结果不可靠。

故，有必要提供一种新的核酸提取介质来解决上述问题。

发明内容

针对现有技术中存在的上述问题，本发明提供一种更加安全、方便提取核酸的纳米多向层析核酸提取介质及其制备方法。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：一种纳米多向层析核酸提取介质，其具有高分子碳水化合物的基材与渗入所述基材中提取物，该提取物包括第一层的盐酸胍、SDS、EDTA混合物，位于第二层保护剂，位于第三层的盐酸胍、SDS、EDTA混合物及位于第四层的保护剂，所述第一层的盐酸胍、SDS、EDTA混合物与第三层的盐酸胍、SDS、EDTA混合物含量不同。

具体的，所述保护剂为羟乙基淀粉。

为实现上述目的，本发明还采用如下技术方案：一种纳米多向层析核酸提取介质的制备方法，其特征在于：其步骤如下，第一步骤：提供吸附用的基材；第二步骤：在所述基材上滴加第一种缓冲液直至所述基材吸水饱和，其中，第一种缓冲液按照重量份数计：盐酸胍占缓冲液的0.7-10.0％，SDS占缓冲液的0.7-10.2％，EDTA占缓冲液的0.06-6.0％；第三步骤：将滴加第一种缓冲液的基材干燥；第四步骤：对所述基材进行滴加具有50-100mg/ml羟乙基淀粉的保护剂，该保护剂覆盖于第一种缓冲液上，直至保护剂被所述基材吸收完成沉降；第五步骤：干燥；第六步骤：在所述基材上滴加第二种缓冲液直至基材吸水饱和，第二种缓冲液覆盖于上述保护剂上，其中，第二种缓冲液按照重量份数计：盐酸胍占缓冲液的0.5-8.8％，SDS占缓冲液的1-5.5％，EDTA占缓冲液的0.05-0.06％；第七步骤：将滴加第二种缓冲液的基材干燥；第八步骤：对所述基材进行滴加具有50-100mg/ml羟乙基淀粉的保护剂，所述保护剂覆盖于所述第二种缓冲液上。第九步骤：干燥。

具体的，用分析天平称量，并确认基材吸水是否饱和，当相邻两次质量差小于0.001g，表面基材吸水已饱和。

具体的，确认提取介质已干燥完成的方法为：所述基材放置当相邻两次测量质量差小于0.001g，提取介质完成干燥。

具体的，在第一步骤中，将基材进行干燥，其干燥方式为：-5℃-5℃的真空中干燥，再置于常温相对湿度≤30％下达到平衡。