[发明专利]一种重组肠激酶的纯化方法在审
申请号: | 201611215132.1 | 申请日: | 2016-12-26 |
公开(公告)号: | CN108239628A | 公开(公告)日: | 2018-07-03 |
发明(设计)人: | 文良柱;张媛 | 申请(专利权)人: | 江苏万邦生化医药集团有限责任公司;上海复星医药(集团)股份有限公司 |
主分类号: | C12N9/64 | 分类号: | C12N9/64 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 221004 江苏省*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 洗脱缓冲液 重组肠激酶 配比为 洗脱液 洗脱 疏水层析 体积混合 肠激酶 电泳纯 芳香族 收率 | ||
1.一种重组肠激酶的纯化方法,其特征在于,所述方法采用芳香族疏水层析填料,通过洗脱液洗脱得到纯品;所述洗脱液由洗脱缓冲液A与洗脱缓冲液B等体积混合形成,所述洗脱缓冲液A的配比为:20mmol Tris-HCl、1mol/L NH4Cl,pH为7.0-8.0;所述洗脱缓冲液B的配比为20mmolTris-HCl,pH为7.0-8.0。
2.根据权利要求1所述的重组肠激酶的纯化方法,其特征在于,所述芳香族疏水层析填料中的疏水配基为苯基。
3.根据权利要求2所述的重组肠激酶的纯化方法,其特征在于,洗脱缓冲液A或洗脱缓冲液B的pH为7.2-7.8。
4.根据权利要求3所述的重组肠激酶的纯化方法,其特征在于,洗脱缓冲液A或洗脱缓冲液B的pH为均7.5。
5.根据权利要求1所述的重组肠激酶的纯化方法,其特征在于,洗脱用缓冲液流速为:线流速50-150cm/h。
6.根据权利要求5所述的重组肠激酶的纯化方法,其特征在于,洗脱用缓冲液流速为:线流速80-120 cm/h。
7.根据权利要求6所述的重组肠激酶的纯化方法,其特征在于,洗脱用缓冲液流速为:线流速100cm/h。
8.根据权利要求1所述的重组肠激酶的纯化方法,其特征在于,所述芳香族疏水层析填料,首先在洗脱液中浸泡2-5h,浸泡后的填料装柱形成层析柱。
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