[发明专利]阿魏菇多糖作为制备树突状细胞疫苗佐剂的应用

说明书

本发明公开了阿魏菇多糖（PFPS）作为制备树突状细胞疫苗佐剂的应用。阿魏菇多糖具有刺激树突状细胞成熟的作用，从而促进树突状细胞疫苗免疫反应，提高抗肿瘤效果。

技术领域

本发明属于医药领域，具体涉及阿魏菇多糖作为制备树突状细胞疫苗佐剂的应用。

背景技术

树突状细胞（dendritic cell；DC）是机体专职的抗原递呈细胞，可以识别、捕获和加工抗原，并将抗原递呈给naïve T细胞，激活抗原特异性的免疫反应，从而连接固有免疫系统和获得性免疫系统。在抗原递呈过程中，不同的信号参与了抗原特异性T细胞的激活，包括MHC-多肽复合物、DC和T细胞表面共刺激分子之间的相互作用、DC分泌的细胞因子等。DC分泌的白细胞介素-12（IL-12）可促进CD4⁺ Th1型免疫反应及细胞毒性T淋巴细胞反应，这两种免疫反应在肿瘤治疗中起着重要作用。DC疫苗（DC-based vaccine）是一种具有前景的肿瘤治疗性疫苗形式，在临床上可以诱导产生抗原特异性的免疫反应，安全性高。然而，由于DC未达到最佳成熟状态，并且分泌的IL-12水平较低，导致DC疫苗的临床效果有限。因此，需要通过佐剂提高DC成熟状态及IL-12分泌水平，从而提高DC疫苗的临床效果。

佐剂（如钟样受体激动剂：toll-like receptor (TLR) agonists）被广泛应用于新型疫苗（如多肽/蛋白疫苗、DNA疫苗及DC疫苗等），以提高疫苗的免疫原性。但是大部分佐剂具有毒副作用，不适合临床应用。目前美国FDA及欧洲批准用于临床应用的佐剂种类非常少，仅包括铝化合物佐剂、MF59、AS03、AF03及AS04。因此，急需开发新型、安全、高效的免疫佐剂增强疫苗的免疫原性，提高抗原特异性免疫反应，发挥疫苗良好的预防和治疗效果。

中草药已经有几千年的临床应用历史，临床效果与其有效成分对机体的免疫调节作用，尤其是对抗原递呈细胞的成熟状态及功能的调节密切相关，其安全性得到了充分的验证，并具有多效性，无依赖性等特征，是筛选安全、高效佐剂的理想来源。

发明内容

本发明的目的是将从中药阿魏菇（Pleurotus ferulae）中提取纯化得到的阿魏菇多糖（PFPS）作为树突状细胞疫苗佐剂，刺激树突状细胞成熟，从而促进树突状细胞疫苗免疫反应，提高抗肿瘤效果。

为了解决上述技术问题，本发明提供了如下的技术方案：

阿魏菇多糖作为制备树突状细胞疫苗佐剂的应用。

优选地，所述阿魏菇多糖为均一多糖，分子量为1500～1600kDa。

阿魏菇多糖的提取纯化方法，包括：

（1）采用水提醇沉法得到阿魏菇粗多糖；

（2）将阿魏菇粗多糖溶解于水中，然后过二乙氨基乙基纤维素柱，流动相为水和/或盐水。

优选地，所述盐水为浓度为0.05～0.3mol/L的氯化钠溶液。

优选地，所述盐水为浓度为0.05mol/L的氯化钠溶液。

附图说明

附图用来提供对本发明的进一步理解，并且构成说明书的一部分，与本发明的实施例一起用于解释本发明，并不构成对本发明的限制。在附图中：

图1 （A）阿魏菇粗多糖的洗脱曲线及洗脱液多糖含量，（B）不同流动相所得的洗脱液体外刺激DC成熟的活性。

图2 （A）为PFPS-0.05的纯化及分子量检测过丙烯葡聚糖凝胶S-300HR的洗脱曲线，（B）PFPS-0.05的高效凝胶渗透色谱图。