[发明专利]一种安化黑茶识别方法

说明书

本发明涉及一种安化黑茶识别方法，包括以下步骤：（1）以安化黑茶及其他产地的黑茶为样品，分别用80℃以上的热水提取各种样品，并得到提取液，用液相色谱‑离子阱飞行时间串联质谱仪对每种提取液进行成分分析，并对各成分进行定量分析，得到各种样品中的成分及其含量；（2）利用随机森林分析法分析步骤（1）各种样品中的成分及其含量，建立不同产地黑茶的随机森林法判别模型，得到不同产地黑茶样品的多维尺度变换图，利用多维尺度变换图进行黑茶的识别。该方法利用了液相色谱‑离子阱飞行时间串联质谱技术和随机森林分析法，实现了90%以上的正确识别率。

技术领域

本发明涉及一种安化黑茶识别方法，属茶叶的分析检测技术领域。

背景技术

安化黑茶作为非物质文化遗产，还被评为国家地理标志产品，近年来成为国内外茶叶市场的新贵，深受广大消费者青睐。建立安化黑茶原产地鉴别方法，科学客观地评价安化黑茶的品质状况，将为安化黑茶的生产加工、质量控制和功能研究提供技术及理论依据，促进安化黑茶的原产地保护和产业持续健康发展。由于茶叶种植的产地、气候、环境等因素的不同造成它们的常规化学成分和特殊化学成分的种类和含量存在差异，可通过测定不同产地茶叶的化学成分种类及含量的差异对其产地进行判别分析。但是茶叶中有些成分具有相似的结构，对化合物鉴别分析提出了更高的要求，因而采用定性能力强的高分辨率质谱仪对这些复杂的混合物进行鉴别十分必要。目前有关茶叶中提取物的代谢组学研究，大部分采用低分辨的离子阱或四级杆质谱，存在着代谢物信息缺失或不全的可能性。

发明内容

本发明的目的是提供基于一种高分辨质谱技术的安化黑茶识别方法，通过液相色谱-离子阱飞行时间串联质谱检测技术获得相关水溶性成份色谱峰面积的相对百分含量数值，经过化学计量学软件自动处理，可实现对安化黑茶与其它产地黑茶的快速、有效识别。

本发明的技术方案是，提供一种安化黑茶识别方法，包括以下步骤：

(1)以安化黑茶及其他产地的黑茶为样品，分别用80℃以上的热水提取各种样品，并得到提取液，用液相色谱-离子阱飞行时间串联质谱仪对每种提取液进行成分分析，并对各成分进行定量分析，得到各种样品中的成分及其含量；

(2)利用随机森林分析法分析步骤(1)各种样品中的成分及其含量，建立不同产地黑茶的随机森林法判别模型，得到不同产地黑茶样品的多维尺度变换图，利用多维尺度变换图进行黑茶的识别。

本发明利用高分辨质谱技术的收集一系列黑茶的，特别是安化黑茶的成分及其含量的数据，将这些数据进行一些常规的处理后，建立判别模型，判别模型是依据产地不同将各种黑茶(主要是安化黑茶)进行区域化的分类，可以根据待测样品的成分及含量在该判别模型中的位置(是否落入了安化黑茶的区域)进行可视化的识别。

进一步地，步骤(1)中，用85-95℃的热水恒温浸泡样品15-25min，得到提取液。

进一步地，步骤(1)中，流动相A为乙腈，流动相B为4-6mM乙酸铵的水溶液，所述乙酸铵的水溶液中还添加体积分数为0.1％的甲酸。

进一步地，步骤(1)中，实验条件如下：

质谱离子源：电喷雾离子源；负离子扫描，扫描范围：m/z 100～1000；加热模块温度200℃；CDL温度200℃；雾化气流速1.5L/min；干燥气流速10L/min；离子源电压：检测器电压1.7kV；质量数校准方法：自动调谐优化电压，外标法校准质量数。

进一步地，步骤(2)中，利用安化黑茶中含量最多的20种以上的成分及其含量，作为建立随机森林法判别模型中安化黑茶的数据。

进一步地，步骤(2)中，利用安化黑茶中茶氨酸、木糖、没食子酸、没食子儿茶素、4-没食子酸奎宁酸、山奈酚-3-O-芸香苷、牡荆苷这7种成分及其含量，作为建立随机森林法判别模型中安化黑茶的数据。