[发明专利]一种从发酵液中分离纯化洛伐他汀的方法

说明书

本发明提供了一种从发酵液中分离纯化洛伐他汀的方法。本发明还提供了从发酵液中分离提取代谢产物洛伐他汀的工艺流程。本发明整个操作流程中，能够高效的得到结晶产物。

技术领域

本申请涉及生物技术领域，尤其是生物活性物质分离纯化领域。具体而言，本申请涉及发酵液中洛伐他汀的分离纯化方法。

背景技术

洛伐他汀是第一个经FDA批准上市的降血脂他汀类药物，由于其竞争性的抑制体内胆固醇合成的关键酶-羟甲基戊二酰辅酶A还原酶的活性，从而起到降低血液中胆固醇含量的作用。

目前，各大生产药厂存在一个共同的问题：提取成本高，收率低。为此在日趋竞争激烈的市场经济条件下，开发出低成本、适合于工业化生产的洛伐他汀提取工艺具有很重要的意义。

发明内容

本发明提供了一种从发酵液中分离纯化洛伐他汀的方法。该方法具有工艺简单、品质稳定、产品收率高等优点。本发明的技术方案如下：

(1)发酵液预处理：将发酵液离心，收集菌丝体，备用；

(2)乙醇浸提：将步骤(1)中处理后的菌丝体，用无水乙醇浸提，控制浸提时间与浸提温度，获得浸提液；

(3)萃取：将步骤(2)的浸提液加醋酸乙酯萃取，获得萃取液；

(4)闭环：将步骤(3)中萃取液，用两倍体积的醋酸洗涤后浓缩闭环，控制闭环温度；

(5)冷却结晶：将步骤(4)中浓缩液快速降温，控制降温速度，并离心获得粗晶粉；

(6)将步骤(5)中收集到的粗晶粉，甲醇加热溶解，配成10％左右的甲醇溶液；

(7)脱色：将步骤(6)中获得的甲醇溶液，通过活性炭脱色；

(8)重结晶：将步骤(7)中获得的脱色溶液，减压浓缩，获得晶体产物。

优选步骤(1)中离心采用连续流离心，4000-5000rmp转速；

优选步骤(2)中浸提时间控制在3-5h，浸提温度控制在40-50℃，所用乙醇与菌丝体的物料比控制在4∶1-6∶1；

优选步骤(4)中的闭环温度控制在70-90℃，闭环时间控制在4-6h；

优选步骤在步骤(5)中的冷却温降速度为7-9℃/min，冷却温度至15-20℃

优选步骤(7)中重结晶的温度在30-35℃；

附图说明

没有。

具体实施方式

以下结合实例来进一步解释本发明，但实施案例并不对本发明做任何形式的限定。

实施例1

(1)发酵液预处理：将发酵液连续流离心，4500rmp转速，收集菌丝体，备用；

(2)乙醇浸提：将步骤(1)中处理后的菌丝体，用无水乙醇浸提，所用乙醇与菌丝体的物料比控制在5∶1，浸提时间控制在3h，浸提温度控制在45℃，获得浸提液；

(3)萃取：将步骤(2)的浸提液加醋酸乙酯萃取，获得萃取液；

(4)闭环：将步骤(3)中萃取液，用两倍体积的醋酸洗涤后浓缩闭环，闭环温度控制在80℃，闭环时间控制在4h；

(5)冷却结晶：将步骤(4)中浓缩液快速降温，冷却温降速度为8℃/min，冷却温度至20℃，并离心获得粗晶粉；

(6)将步骤(5)中收集到的粗晶粉，甲醇加热溶解，配成10％左右的甲醇溶液；