[发明专利]一种猪副猪嗜血杆菌病和猪支气管败血波氏杆菌病二联灭活疫苗

说明书

本发明的目的是提供一种猪副猪嗜血杆菌病和猪支气管败血波氏杆菌病二联灭活疫苗，其中抗原为灭活的保藏编号为CGMCC No.5480的副猪嗜血杆菌YBH05株和保藏编号为CCTCC NO:M 2016606的猪支气管败血波氏杆菌YBB01株；本发明的疫苗所使用的副猪嗜血杆菌YBH05株和猪支气管败血波氏杆菌YBB01株的毒力强高、免疫原性好并具有较好的交叉保护性。本发明制备的疫苗的安全性良好，未出现由疫苗引起的任何局部和全身不良反应。保存期试验中经过性状、安全性试验、效力试验数据的分析，各项指标均稳定有效；效力试验结果证明，YBH05株和YBB01株能产生良好抗体，并能产生较好的攻毒保护力。

技术领域

本发明属于兽用生物制品技术领域，具体涉及一种猪副猪嗜血杆菌病和猪支气管败血波氏杆菌病二联灭活疫苗。

背景技术

支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica，Bb)可引起猪发生非进行性萎缩性鼻炎(non-progressive atrophic rhinitis，NPAR)和支气管肺炎，也是猪呼吸道综合征(porcine respiratory disease complex，PRDC)的重要致病因子之一。此类疾病现已广泛分布于养猪业发达的国家。近年来随着中国集约化养猪业的发展及猪的引种、调动频繁，由Bb引起的NPAR、PRDC等疾病也随之扩散蔓延，造成较大经济损失。并且易与副猪嗜血杆菌(Haemophilus suis，HPS)有协同致病作用，这样的协同作用可提高呼吸道疾病的发病率并增加疾病的严重程度，造成严重的经济损失。因此，迫切需要对中国的HPS和Bb的流行情况进行系统研究，并迫切需要研制出一种猪副猪嗜血杆菌病和猪支气管败血波氏杆菌病二联灭活疫苗，来防治这两种疫病对养殖业造成的危害。

发明内容

本发明的目的是提供一种猪副猪嗜血杆菌病和猪支气管败血波氏杆菌病二联灭活疫苗，从而弥补现有疫苗的不足。

本发明还提供一种灭活疫苗，其中抗原为灭活的副猪嗜血杆菌YBH05株和猪支气管败血波氏杆菌YBB01株；

其中副猪嗜血杆菌YBH05株已于2011年11月23日送交北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏编号为CGMCC No.5480。

猪支气管败血波氏杆菌YBB01株(Bordetella bronchiseptica YBB01)，于2016年11月1日保藏在中国武汉、武汉大学的中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:M2016606。

上述的灭活疫苗，抗原的灭活采用甲醛灭活；

本发明的二联灭活疫苗的制备方法如下：

1)油相：MONTANIDETM ISA 201 VG佐剂(以下简称201佐剂)；

2)水相制备：将纯粹检验合格的YBH05株和YBB01株抗原，将菌泥分别重悬于适量灭菌的生理盐水中，均稀释至4.0×10⁹CFU/ml灭活后，检验合格后，作为抗原；

3)乳化：

水相和油相预热至31℃，按质量比1:1混合，4000r/min搅拌30～40分钟；

4)分装：定量分装，加盖密封，并粘贴标签，置2～8℃保存。

本发明的疫苗所使用的副猪嗜血杆菌YBH05株和猪支气管败血波氏杆菌YBB01株的毒力强高、免疫原性好并具有较好的交叉保护性。本发明制备的疫苗的安全性良好，未出现由疫苗引起的任何局部和全身不良反应。保存期试验中经过性状、安全性试验、效力试验数据的分析，各项指标均稳定有效；效力试验结果证明，YBH05株和YBB01株能产生良好抗体，并能产生较好的攻毒保护力。

具体实施方式