[发明专利]单羽火筒树抗癌活性部位LA-D及其药物组合物和其化学成分分离和鉴定方法

说明书

提供单羽火筒树[九节狸，Leea asiatica(Linnaeus)Ridsdale]抗癌活性部位LA‑D及其中的化学成分的提取和鉴定方法，以及，以该活性部位组成的药物组合物，以及它们在制备治疗肿瘤的药物中的应用。本发明采用色谱柱层析及半制备高效液相色谱的分离方法，以及质谱和核磁共振波谱的鉴定方法，从LA‑D中分离、鉴定出了山奈酚、山萘酚‑3‑O‑α‑L‑吡喃鼠李糖苷、槲皮素、异槲皮苷、槲皮素‑3‑O‑α‑L‑吡喃鼠李糖苷、杨梅素、杨梅素‑3‑O‑α‑L‑吡喃鼠李糖苷、Europetin、Europetin 3‑O‑α‑L‑rhamnopyranoside和(‑)‑儿茶素和山楂酸。本发明首次阐明LA‑D的主要化学成分，通过提供的方法，可以简单、快速地从单羽火筒树及其抗癌活性部位LA‑D中获取上述化学成分，用于建立单羽火筒树及其抗癌活性部位LA‑D的质量控制标准。

技术领域：

本发明属于天然产物提取分离技术领域，尤其涉及单羽火筒树抗癌活性部位LA-D，其药物组合物，及其化学成分分离和鉴定方法。

背景技术：

单羽火筒树[Leea asiatica(Linnaeus)Ridsdale]，又名九节狸，为葡萄科火筒树属植物。单羽火筒树的根具有清热利但的功能，用于治疗黄疸肝炎[朱兆云,云南天然药物图鉴(第5卷).昆明:云南科技出版社.2009:285]。本申请人调查发现，在云南德宏，当地居民称单羽火筒树为“九节狸”，用其治疗扁桃腺炎、三腺炎、乳房纤维瘤、子宫肌瘤、卵巢囊肿、毛囊炎等疾病。前人曾报道该植物甲醇提取物具有抗肠道寄生虫和抗氧化的作用[SenS,De B,Devanna N,Chakraborty R.Anthelmintic and in vitro antioxidantevaluation of fractions of methanol extract of Leea asiatica leaves.AncientScience of Life 2012,31(3),101-106]。单羽火筒树的化学成分及其提取物的抗癌活性尚未见报道。因此，阐明单羽火筒树抗癌活性的化学物质基础，对进一步的新药研发和质量控制具有重要的意义。

发明内容：

本发明针对现有技术存在了上述问题，提供单羽火筒树[Leea asiatica(Linnaeus)Ridsdale]抗癌症活性部位LA-D，以其活性成分的药物组合物，以及LA-D中的化学成分的提取和鉴定方法。由于单羽火筒树具有一定的抗癌症活性，但是其活性部位及其化学成分不清楚，不能建立质量控制标准。所以，本发明提供了单羽火筒树的活性部位乙酸乙酯部位LA-D分离鉴定方法用于解决这个技术问题。

为了实现本发明的上述目的，本发明提供了如下的技术方案：

单羽火筒树提取物乙酸乙酯萃取部位LA-D，所述的LA-D由下述方法制备而得：单羽火筒树干燥全株粉碎后用甲醇冷浸7天，过滤，滤渣继续提取，总共提取4次，合并滤液，回收溶剂，得浸膏，将浸膏用水制成混悬液，分别用石油醚、氯仿和乙酸乙酯萃取，回收溶剂获得石油醚部分、氯仿部分、乙酸乙酯部分，乙酸乙酯部分为LA-D。

如所述的单羽火筒树提取物乙酸乙酯萃取部位LA-D，其中所述的LA-D中化学成分山奈酚、山萘酚-3-O-α-L-吡喃鼠李糖苷、槲皮素、异槲皮苷、槲皮素-3-O-α-L-吡喃鼠李糖苷、杨梅素、杨梅素-3-O-α-L-吡喃鼠李糖苷、Europetin、Europetin 3-O-α-L-rhamnopyranoside、(-)-儿茶素和山楂酸的总含量以重量百分比计，占LA-D的10-95％。

如所述的单羽火筒树提取物乙酸乙酯萃取部位LA-D，其中所述的LA-D中化学成分山奈酚、山萘酚-3-O-α-L-吡喃鼠李糖苷、槲皮素、异槲皮苷、槲皮素-3-O-α-L-吡喃鼠李糖苷、杨梅素、杨梅素-3-O-α-L-吡喃鼠李糖苷、Europetin、Europetin 3-O-α-L-rhamnopyranoside、(-)-儿茶素和山楂酸是从单羽火筒树乙酸乙酯部位LA-D分离得到，步骤为：