[发明专利]一种检测喹诺酮类药物沙拉沙星的酶联免疫试剂盒

权利要求书

1.一种检测沙拉沙星的酶联免疫试剂盒，其特征在于：它由带有微孔的包被板，沙拉沙星标准品，抗沙拉沙星的包被抗原，沙拉沙星酶标抗体，浓缩洗涤液，显色液 A，显色液 B和终止液组成；所述的包被板配置有采用 1％明胶作为封闭液，抗体的稀释液选用0.15mol/L 的磷酸盐缓冲溶液，所述的浓缩洗涤液为含有 0.07％～ 0.1％吐温的 Tris-HCL缓冲溶液，显色液 A 为柠檬酸和柠檬酸钠缓冲溶液，显色液 B 为四甲基联苯胺和二甲基亚砜、含甘油的溶液，所述的终止液为 2mol/L 的硫酸溶液。

2.根据权利要求 1 所述的检测沙拉沙星的酶联免疫试剂盒，其特征在于所述的沙拉沙星标准品，是从干粉中稀释得到，稀释液为0.15mol/L的磷酸盐缓冲溶液，共6瓶，沙拉沙星浓度分别为：0 ng/mL，0.1 ng/mL，0.3 ng/mL，0.9 ng/mL，2.7 ng/mL，8.1 ng/mL。

3.一种检测沙拉沙星的酶联免疫试剂盒，其特征在于：取包被有沙拉沙星抗原的微孔包被板，加入 50 μL沙拉沙星标准品和处理好的样品到各自的微孔中，同时加入50 μL 沙拉沙星抗体，震荡混匀，25℃反应30min 左右，洗涤液洗涤五次，然后再加入150 μL酶，25℃反应30min,洗涤液洗涤5次加50 μL显色液A和50 μL显色液B，25℃孵育15分钟后加终止液50 μL，在450nm-630nm处测量吸光值(OD值)，对照标准曲线计算样品中的沙拉沙星含量。

4.一种检测沙拉沙星的酶联免疫试剂盒，其特征在于所述的样品处理是根据猪肉、猪肝、虾、鱼、甲鱼、鸡肉、鸡蛋这些样品选择优化的前处理方法，包括：样品切碎、研磨、有机溶剂的提取、取上清、吹干，复溶，提取等。

5.一种检测沙拉沙星的酶联免疫试剂盒，包括沙拉沙星特异性抗体、包被有抗抗体的酶联板和酶标记物；所述沙拉沙星特异性抗体为沙拉沙星的单克隆杂交瘤细胞株A-2-4CCMCC No.1610分泌的单克隆抗体；所述酶标记物为酶标沙拉沙星半抗原。

6.一种检测沙拉沙星的酶联免疫试剂盒，其特征在于所述抗抗体为羊抗鼠或羊抗兔抗抗体。

7.一种检测沙拉沙星的酶联免疫试剂盒，其特征在于:所述浓缩洗涤液为0.01mol，pＨ7. 4，含有0. 8%一1. 2%吐温80和0. 5%硫柳汞防腐剂的磷酸盐缓冲液；所述终止液为1－2mol/L的硫酸、盐酸或氢氧化钠溶液；所述封闭液为含有3-10%的牛血清，2%酪蛋白的磷酸盐缓冲液；所述百分含量均为质量百分含量。