[发明专利]一种青稞的紫外胁迫相关基因及其应用有效
申请号: | 201611147881.5 | 申请日: | 2016-12-13 |
公开(公告)号: | CN106636132B | 公开(公告)日: | 2019-07-09 |
发明(设计)人: | 曾兴权;原红军;徐齐君;韦泽秀;王玉林;扎桑;白丽军;尼玛扎西 | 申请(专利权)人: | 西藏自治区农牧科学院农业研究所;成都生命基线科技有限公司 |
主分类号: | C12N15/29 | 分类号: | C12N15/29;C12N15/10;C07K14/415;C12Q1/686;C12Q1/6895 |
代理公司: | 成都高远知识产权代理事务所(普通合伙) 51222 | 代理人: | 李高峡;张娟 |
地址: | 850032 西藏自*** | 国省代码: | 西藏;54 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 紫外胁迫 基因 表达水平 相关基因 胁迫 核苷酸序列 控制提供 理论支持 生长条件 市场应用 紫外辐射 检测 可用 克隆 辐射 生长 应用 | ||
本发明公开了一种与青稞的紫外胁迫相关的基因及其克隆方法,该基因可用于检测青稞是否受到紫外胁迫。本发明提供了青稞的紫外胁迫相关基因,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明基因的表达水平与青稞是否受青紫外辐射胁迫相关,通过检测本发明基因的表达水平可以判断青稞是否受过紫外辐射胁迫,为青稞生长后续生长条件的控制提供理论支持,具有良好的市场应用前景。
技术领域
本发明涉及一种青稞的紫外胁迫相关基因及其应用。
背景技术
青稞英文名:hullessbarley,是禾本科大麦属的一种禾谷类作物,因其内外颖壳分离,籽粒裸露,故又称裸大麦、元麦、米大麦。主要产自中国西藏、青海、四川、云南等地,是藏族人民的主要粮食。青稞在青藏高原上种植约有3500年的历史,从物质文化之中延伸到精神文化领域,在青藏高原上形成了内涵丰富、极富民族特色的青稞文化。有着广泛的药用以及营养价值,已推出了青稞挂面、青稞馒头、青稞营养粉等青稞产品。
臭氧层变薄导致的到达地面的紫外辐射增强对植物的影响已经引起了全社会的广泛关注,是当今学术领域研究的主要课题。紫外胁迫会严重影响青稞的生长发育,对最终的产量造成较大的影响。
然而,目前在检测青稞是否受到紫外辐射方面,却未见有效的手段。
发明内容
本发明提供了一种与青稞的紫外胁迫相关的基因及其克隆方法,该基因可用于检测青稞是否受到紫外胁迫。
本发明提供了青稞的紫外胁迫相关基因,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
本发明提供了一种青稞的紫外胁迫相关蛋白,其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
本发明提供了一种克隆前述青稞的紫外胁迫相关基因的方法,步骤如下:
1)取青稞,提取RNA;
2)以SEQ ID NO.3~SEQ ID NO.4所示引物对为引物进行反转录,纯化,即可。
步骤2)中,反转录的体系和条件如下:
反转录反应体系:
反转录反应条件:
步骤2)中,纯化的方法是:纯化的方法是琼脂糖凝胶电泳中回收目标DNA片段的方法。
本发明提供了一种检测青稞受紫外辐射胁迫的试剂盒,包括任选的用于检测前述基因表达水平或者前述蛋白含量的试剂。
其中,所述试剂是PCR方法用试剂。
其中,所述试剂包含SEQ ID NO.5~SEQ ID NO.6所示引物对。
其中,所述试剂还包括如下试剂:5×RT Reaction Mix、Oligo(dT)、TUREscriptH-RTase/RI Mix以及RNase Free dH2O,它们的体积比为4:1.4:1:8.6。
本发明发现了青稞紫外辐射胁迫相关的基因(核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示),本发明基因的表达水平与青稞是否受青紫外辐射胁迫相关,受到紫外辐射胁迫后,青稞的本发明基因的表达水平会显著提升,通过检测本发明基因的表达水平或者蛋白的含量可以判断青稞是否受过紫外辐射胁迫,为青稞生长后续生长条件的控制提供理论支持,具有良好的市场应用前景。
显然,根据本发明的上述内容,按照本领域的普通技术知识和惯用手段,在不脱离本发明上述基本技术思想前提下,还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。
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