[发明专利]一种添加细菌纤维素壳核结构的复合油漆絮凝剂

权利要求书

1.一种添加细菌纤维素壳核结构的复合油漆絮凝剂，其特征在于，包括以下步骤：

（1）菌种分离纯化

将处理后期阶段的油漆废水装入无菌三角瓶中，置于4℃保存，将种子培养基于121℃下灭菌，冷却后取100μL废水接种到100ml的种子培养基中，于37℃恒温扩大培养24h，然后将培养液分别稀释到10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6倍，再将各个稀释后的菌悬液涂布于分离培养基上，37℃恒温培养24h，挑出形态好的菌落完成初步分离，再将挑选出的各个菌接种于种子培养基中，37℃恒温培养24h，对各个菌的培养液稀释并进行划线分离纯化，将最后得到的纯化单菌落保存在分离培养基上；

（2）菌种的筛选

将步骤（1）分离出来的菌分别用接种环接种于种子培养基中，在30℃，160r/min的条件下培养72h，用4g/L的高岭土悬浊液测试菌种的絮凝率，将絮凝率大于50%的菌种保留，并且进行多次传代，将筛选出的菌种保藏；

（3）菌种的发酵培养

a、将啤酒废水和制糖发酵废水分别在5000rpm下离心20min，去除悬浮杂质，其中制糖发酵废水总糖含量为19.85g/L，总氮含量为3263.3mg/L，啤酒废水总糖含量为196.1g/L，总氮含量为1796.8mg/L，然后按照总糖浓度7g/L，炭源和氮源比50:1进行稀释，并且添加磷酸二氢钠和磷酸氢二钠，其中磷酸二氢钠浓度为2g/L，磷酸氢二钠浓度为5g/L，再加入硫酸镁调节发酵培养基的pH为9，高压灭菌备用；

b、将步骤（2）中保藏在斜面的产生菌菌种接种到发酵培养基中，在30℃、150r/min恒温振荡器上培养3h，使各菌株均处于对数生长期，制成菌种悬浮液，按照5-10%的接种量接种到100ml步骤a制备的发酵培养基中，在30℃、转速为160r/min条件下培养72h；

c、将步骤b制得的发酵液置于4℃高速冷冻离心机上于8000r/min离心30-40min，将得到的上清液中加入2倍量的无水乙醇在4℃下静置24h，然后继续在4℃条件下于8000r/min离心30-40min，将得到的沉淀用无水乙醇反复洗涤，置于透析袋中透析48h，冷冻干燥后得微生物絮凝剂；

(4)复合磁性微球的制备

d、将六水合氯化铁和四水合氯化亚铁按照三价铁和二价铁摩尔比1：1混合，电动搅拌使其充分混匀，在30℃时边搅拌边缓慢滴加1mol/L的氢氧化钠直至溶液的pH为11，加热使其反应温度控制在60℃，然后逐滴加入油酸搅拌反应1-1.5h，反应结束后冷却至室温，然后用蒸馏水反复洗涤呈中性，真空干燥后磨碎备用；

e、将细菌纤维素用0.1mol/L的氢氧化钠溶液完全浸没，然后置于90℃恒温水浴锅中加热0.7-1h，自然冷却至室温后用蒸馏水反复浸泡冲洗至中性，烘干后放置容器中，加入适量的蒸馏水，在氮气环境中，升高温度至45-55℃搅拌分散均匀，然后依次加入丙烯酸、过硫酸钾、N，N-亚甲基双丙烯酰胺和步骤c制备的微生物絮凝剂，反应2.5-3h后取出反应物，在60℃烘箱中干燥，用无水乙醇于80℃下抽提8h，再用蒸馏水洗涤呈中性后，干燥、粉碎；

f、将海藻酸钠用蒸馏水溶解制成浓度为3%的海藻酸钠溶液，再加入步骤e制备的产物超声搅拌均匀，静置除去气泡，再将氯化钙用蒸馏水溶解制成浓度为5%的氯化钙溶液，搅拌均匀后用适宜直径的滴管滴加到海藻酸钠混合溶液中，得到的复合微球用蒸馏水洗涤数遍后置于真空干燥箱中干燥，冷却至室温即可。

2.根据权利要求1所述一种添加细菌纤维素壳核结构的复合油漆絮凝剂，其特征在于，所述的分离培养基的配方配比为：牛肉膏3-4g/L、蛋白胨10-12g/L、氯化钠5-6g/L、琼脂15-20g/L、加蒸馏水至1000ml；调节pH值至7.0-7.2，于121℃灭菌20min；种子培养基配方比为：牛肉膏3-4g/L、蛋白胨10-13g/L、氯化钠5-7g/L、加蒸馏水至1000ml，调节pH值至7-7.2，于121℃灭菌20min。

3.根据权利要求1所述一种添加细菌纤维素壳核结构的复合油漆絮凝剂，其特征在于，所述步骤（4）中各原料按照重量份配比为：六水合氯化铁12.1-12.8、油酸0.4-0.6、细菌纤维素5.8-7.5、丙烯酸24-26、过硫酸钾0.3-0.4、N，N-亚甲基双丙烯酰胺0.01-0.02、海藻酸钠8.8-10、微生物絮凝剂1.8-2.2、四水合氯化亚铁适量、氯化钙适量、1mol/L氢氧化钠适量、0.1mol/L氢氧化钠适量、无水乙醇适量、蒸馏水适量。